致犊牛脑炎大肠杆菌的分离鉴定及部分生物学特性研究

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1、类号:密级:学号:2013408029单位代码:10759石河子大学硕士学位论文致犊牛脑炎大肠杆菌的分离鉴定及部分生物学特性研究学位申请人许丹丹指导教师剡根强教授张鲁安研究员申请学位类别专业硕士专业名称兽医研究领域兽医技术服务所在学院动物科技学院中国·新疆·石河子2015年6月IsolationandsomebiologicalcharacteristicsIdentificationofEscherichiacolicausedcalvesencephalitisDissertationSubmittedtoShiheziUniversi

2、tyInFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofAgricultureByXuDanDan(PreventiveVeterinaryMedicine)DissertationSupervisor:Prof.YanGenQiangJune,2015摘要肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)是引起婴幼儿脑炎及败血症的主要致病菌之一,但有关由该菌引起家畜脑炎的群发性病例未见报道。2013年12月,新疆某牛场1周龄左右的犊牛陆续发生了以神经症状为主的死亡,先后死亡犊牛13头,对该奶牛场造成较大的

3、经济损失,为查明并确定导致该奶牛场犊牛脑炎的主要致病菌,在流行病学、临床检查以及剖解的基础上,对采集病死犊牛的脑组织及肝脏组织进行病原菌的分离鉴定。现将病料涂片染色镜检,分离培养,生化试验,O抗原血清型测定,菌毛及肠毒素PCR检测,药敏试验,动物感染试验以及脑组织病理学观察结果报告如下:1.病死犊牛脑脊液分离株均为革兰氏阴性菌,两端钝圆的短杆状,培养特性和生化鉴定结果完全符合大肠杆菌的生物特性;2.分离株呈β溶血,携带K99-STa基因,呈产毒性大肠杆菌特征,O血清型为O161,为少见血清型;3.分离株对氨苄西林、庆大霉素、阿莫西林、环丙沙

4、星、诺氟沙星、恩诺沙星、卡那霉素、氯霉素、四环素、链霉素、复方新诺明、头孢噻吩耐药,对阿米卡星、头孢唑林及新霉素敏感,表明分离株具有多重耐药性;4.分离株的培养物接种家兔及小白鼠,感染家兔3天后死亡,感染小白鼠24小时内死亡,从死亡小白鼠脑组织内回收菌经分离培养、生化鉴定后确定分离菌为大肠杆菌,表明分离株具有较强的致病性,可侵入大脑组织,具有肠外感染特性;5.通过病理组织学观察发现,自主发病死亡犊牛及人工感染家兔的脑组织内血管充血,神经元细胞空泡样变性坏死,脑膜内有大量变性坏死的嗜中性粒细胞浸润,呈现化脓性脑炎变化,表明分离株大肠杆菌可引起

5、犊牛及家兔脑组织损伤;病原学检测结果表明,致该奶牛场犊牛脑炎死亡系由一种携带K99-STa的溶血素毒力因子,O血清型为O161的大肠杆菌感染所致。怀疑是肠道外致病性大肠杆菌。研究结果为本病的诊断提供了病原学依据,也为进一步研究探索致动物脑炎大肠杆菌的生物学特性提供了有价值的试验资料。关键词:犊牛脑炎;大肠杆菌;分离鉴定;病理组织学IAbstractIntestinalpathogenicE.coli(ExPEC)isoneofthemainpathogenscauseencephalitisandsepticemiaininfants,bu

6、tlivestockrelatedencephalitiscausedbybacteriaofmasspathologyhavenotbeenreported.December2013,alarge-scaledairyfarminXinjiangShiheziaweekorsocalveshaveoccurredwiththedeathofthemainsymptomsofencephalitis,13calveshaddied,thedairycausegreatereconomiclosses,asidentifyanddetermi

7、nethecauseoftheencephalitisdairycalvesmajorpathogen,epidemiology,clinicalexamination,andonthebasisofanatomy,braintissueandlivertissuecollecteddeadcalveswereisolatedandidentifiedpathogen.Usingdiseasedsmearstaining,culturecharacteristics,biochemicaltests,Oantigenserotypesmea

8、suredpiliPCRtesting,susceptibilitytesting,animaltesting,andbraininfectionhistopatholo-gic

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