紫苏pfpdat基因克隆、表达特性及单核苷酸多态性分析

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1、分类号Ｑ９４９．９３学号誦０６４ＩＭ、巧袭業大聲全曰制硕±学位论文紫苏巧ｐｚｘ４ｒ基因克隆、表达特性及单核巧酸多态性分析＇Ｉ姓名；赵静Ｉ指导教师：王计平副教授！Ｊ１暑晝＇？．．羣妄赛＾学科专业：植物学；巧－。哨＆五吐户巧夺古４，争Ｖ占＇：：ｉｌｌｆｆｌ；；；：ｌｌＪ培养单位；农学院．巾Ｂ？賴？太谷二Ｑ—五年六月ｍＳｈａｎｘｉＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙＦｕ－ｌｌｔｉｍｅＭａｓｔ：ｅｒＤｅｒｅｅＤｉｓｓｅｉ

2、ｔａ村ｏｎｇＰｆＰＤＡＴＧｅｎｅＣｌｏｎｉｎｇ，ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄＳｉｎｇｌｅＮｕｃｌｅｏｔｉｄｅＰｏｌｍｏｒｈｉｓｍｓＡｎａｌｓｉｓｉｎＰｗｉ７／ｆｌｙｐｙｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓＮａｍｅ：ＪｉｎＺｈａｏｇＳｕｐｅｒｖｉａｏｒ：ＡｓｓｏｃｉａｔｅＰｒｏｆ．ＪｉＰｉｎＷａｎｇｇＭａｏｒ：ＢｏｔａｎｊｙＴｒａｉｎｉｎｕｎｉｔ：ＣｏｌｌｅｅｏｆａｒｉｃｕｌｔｕｒａｌｇｇｇＴａｉｕＳｈａｎｘｉＣｈｉｎａｇ化ｎｅ２０１５，学位论文原创性声明本人郑重声明：所

3、提交的学位论文，是在导师指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中色注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或摸写过的作品成果。对本文研究做出过重要贡献的个人和集体，均已在文中从明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名（亲笔＜？年月曰扭鮮７１［＾学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定。即学位论文的知识产权属山西农业大学；同意学校保留并向国家有关部口或机拘送交论文的原件、复印件和电子版；允许论文被查阅和借阅；本人授权山西农

4、业大学可将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可仪采用影印、缩印或担描等复制手段保存、汇编学位论文。作者签為：曰（亲笔）舞年月／占■导师签違（亲笔）：５／汁｜立年６月，居日车本研究论文由国家自然科学基金（３１２０１２６６）提供资助ＴｈｉｓｗｏｒｋｗａｓｓｕｐｐｏｒｔｅｄｂｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌｙＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（３１２０１２６６）目录ｍ５１一第章文献综述３１紫苏简介３１．１紫苏生理特性３

5、１２３．紫苏成分１４．３紫苏的开发利用价值２植物油脂生物合成的基本途径５２．１兰醜甘油ＴＡＧ的合成５（）２．２Ｈ醜甘油（ＴＡＧ）的积累６２．３植物不饱和脂肪酸的合成７＾２ｉＸ４ｒ基因研７．４／究进展３ＰＣＲ技术及其在植物研究中的应用８４单核巧酸多态性的研究概况９４．１ＳＮＰ的原理及特点９４．２ＳＮＰ检测分析方法９５本研究的目的意义和研究内容１０６技术路线１１第二章紫苏ｆ心ｒ基因克隆及生物信息学分析１２２１欄１１．１试验材料１２１１２

6、．２供试菌株和载体１．３主要试剂１２１．４主要仪器１２２试验方法１２２．１试剂的配置方法１２２１３．２紫苏叶片总ＲＮＡ的提取２．３紫苏叶片总ＲＮＡ的检测１４２一．４ｃＤＮＡ第链的合成１４２．５ＲＮＡ反转录后获得ｃＤＮＡ的ＰＣＲ检测及引物设计１５２．６紫苏ｆ心ｒ基因全长序列的扩增１７２．７紫苏戶Ｚ）乂Ｔ基因ｃＤＮＡ的克隆１７３结果与分析２２３．１紫苏叶片总ＲＮＡ的提取２２３．２紫苏ｆＺＭｒ基因ｃＤＮＡ的克隆２２３．３紫苏ｆＺＭｒ基因的生物信息学分析２５４

7、讨论与结论３４４．１转录组测序的基因发掘及基因ｃＤＮＡ序列全长的获得３４４．２紫苏ｆＺＭｒ基因生物信息学分析３５５小Ｓ３６第Ｈ章紫苏ｆ心ｒ基因表达特性分析３７１材料３７１．１供试材料巧１．２主要试剂及仪器３７２试验方法３８２．１紫苏ＲＮＡ的提取及ｃＤＮＡ的合成３８２３８．２引物的设计２．３半定量ＰＣＲ３８２．４实时巧光定量ＰＣＲ巧２．５引物特异性鉴定３９２．６髙效扩増条件的确立３９２．７实时巧光定量ＰＣＲ数据计算４０３结果与分析４０３．

8、１紫苏ＲＮＡ的提取４０３４１．２ＰＣＲ扩増反应的循环数筛选３．３紫苏戶心了基因的半定量分析１４ＰＣＲ３．４巧光定量反应条件的确定４３３．５ＰＺＭｒ基因在