紫斑牡丹愈伤组织诱导体系建立的研究

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1、分类号密级UDC单位代码10733甘肃农业大学硕士学位论文紫斑牡丹愈伤组织诱导体系建立的研究ThestudyoncallusinductionsystemestablishedofPaeoniarockii张健欣指导教师姓名唐红副教授（甘肃农业大学兰州730070）学科专业名称林木遗传育种研究方向园林观赏植物遗传育种论文答辩日期2015年5月28日学位授予日期2015年6月答辩委员会主席赵文智研究员评阅人蔡国军研究员马彦军副教授2015年6月摘要紫斑牡丹[Paeoniarockii（S.G.HawetL.A.Lauener）]属于芍药科芍药属牡丹组，是原产于中国的野生牡丹和重要的药用植物，有

2、着悠久的栽培历史，而且被广泛应用于园林绿化和环境美化中，观赏价值颇高。本论文以紫斑牡丹营养器官、繁殖器官为材料，运用离体培养的方法，主要研究了不同培养基、不同生长调节剂及其不同浓度对紫斑牡丹叶片、叶柄、胚轴、子叶、花瓣、雄蕊、花药、花丝、心皮和柱头10种外植体愈伤组织培养的影响，筛选愈伤组织培养的最佳外植体、最优培养基，建立了可靠、高效的愈伤组织诱导体系。主要研究结果如下：1．0.1%HgCl2对叶片、叶柄的最佳消毒时间分别为6min、8min。2．离体种胚萌发的最佳培养基为：B5+6-BA2.5mg/L+CH0.5g/L+蔗糖20g/L+琼脂5g/L。3．紫斑牡丹营养器官愈伤组织诱导能力从

3、高到低依次为：无菌叶柄>无菌叶片>大田叶柄>大田叶片，最佳外植体为无菌叶柄，最佳培养基是MS+2.0mg/L6-BA+0.4mg/LNAA+LH0.5g/L+PVP0.1g/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L。4．紫斑牡丹繁殖器官愈伤组织诱导能力从高到低依次为：胚轴>子叶>花瓣>雄蕊>心皮>柱头>花丝>花药，最佳外植体为胚轴，最佳培养基是MS+2.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA+2.0mg/L2,4-D+LH0.5g/L+PVP0.1g/L+蔗糖20g/L+琼脂5g/L。5．紫斑牡丹花器官的愈伤组织诱导率由形态结构的外层到内层逐渐降低：花瓣>雄蕊>心皮>柱头，褐变率则由外层到内层逐渐

4、升高：花瓣<花药<柱头<心皮。6．无菌叶柄愈伤组织的最佳增殖培养基是MS+2.0mg/L2,4-D+1.5mg/LNAA+CH0.5g/L+蔗糖20g/L+琼脂5g/L，胚轴愈伤组织的最佳增殖培养基是B5+0.6mg/L6-BA+LH0.5g/L+PVP0.4g/L+蔗糖20g/L+琼脂5g/L。关键词：紫斑牡丹；愈伤组织；营养器官；繁殖器官ISummaryPaeonia[Paeoniarockii(SGHawetLALauener)]belongstoPaeoniaceaePaeoniaMoutan,isnativetoChina’swildpeonyandimportantmedicin

5、alplants,whichhasalonghistoryofcultivationthatiswidelyusedingardengreeningandlandscapingwithhighornamentalvalue.Inordertochosethebestexplantandmedium,establishareliableandefficientsystemofcallusinduction.Inthispaper,astudyoftheeffectoncallusculturebyusingdifferentculturemediumandgrowthregulatorswit

6、hdifferentconcentrationswasproposed,whichusedvegetativeorgansandreproductiveorgansofPaeoniarockiiasmaterials.Themainresultsshowedthat:1.Thebeststerilizationtimerespectivelyforleaves,petioleswere6min,8min.2.ThebestmediumforembryogerminationwasB5+6-BA2.5mg/L+CH0.5g/L+Sugar20g/L+AGAR5g/L.3.Theabilityt

7、ocallusinductionofVegetativeorgansfromhightolowwas:sterilepetioles>sterileleaf>fieldpetiole>fieldleaf.Thebestexplantwassterilepetiole.ThebestmediumwasMS+2.0mg/L6-BA+0.4mg/LNAA+LH0.5g/L+PVP0.1g/L+Sugar20g/L+