法舒地尔抗白血病机制相关研究

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1、分类号：R733.7单位代码：10719学号：12123003密级：论文题目：法舒地尔抗白血病机制相关研究论文作者：贾少勋指导教师、职称：王一教授学科、专业名称：专业内科学提交论文日期：二○一五年六月创新性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢中所罗列的内容以外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果；也不包含为获得延安大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示谢意。申请学

2、位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。本人签名：日期：关于论文使用授权的说明本人完全了解延安大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属延安大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位仍然为延安大学。学校有权保留送交论文的复印件，允许查阅和借阅论文；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以允许采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。（保密的论文在解密后遵守此规定）本学位论文属于保密在年解密后适用本授权书。本人签名：日期：导师签名：日期：缩略词中英文对照表ABBRE

3、VIATIONS英文缩写英文全称中文全称FBSFdtalbovineserum胎牛血清DMSODimethyylsulfoxide二甲基亚砜ReversetranscriptionPolymeraseChainRT-PCRReaction反转录聚合酶链反应MMP-2Matrixmetalloproteinase-2基质金属酶-2MMP-9Matrixmetalloproteinase-9基质金属酶-9过氧化物酶增殖体活化PPARPeroxisomeproliferator-activatedreceptor受体Rho相关卷曲螺

4、旋形成激ROCKRho-associatedcoiled-coil-formingkinases酶MLCKMyosinlingtchainkinase肌球蛋白轻链激酶MLCMyosinlingtchain肌球蛋白轻链人脐静脉内皮细胞HUVECHumanumbilicalveinendothelialcell高侵袭潜能HCC细胞株HCCLM3Humanhighmetastaticlivercancercells3急淋白血病ALLAcutelymphaticleukemiaECSCEndometrioticstromalcells

5、异位子宫内膜间质细胞慢性粒细胞白血病CMLChronicmyelocyticleukemia非小细胞肺癌NSCLCNon-smallcelllungcancerTGF-βTransforminggrowthfactor-β转化生长因子-βVEGFVascularendothelialgrowthfactor血管内皮生长因子VEGFRVascularendothelialgrowthfactorreceptor血管内皮生长因子受体RBDRho-bindingdomainRho结合结构域ASMCsAirwaysmoothmuscl

6、ecells气道平滑肌细胞法舒地尔抗白血病机制相关研究血液内科研究生贾少勋指导老师王一教授摘要实验目的体外研究Rho激酶抑制剂法舒地尔对HL-60细胞增殖、凋亡、分化以及迁移的作用，初步阐明法舒地尔抑制白血病转移的可能作用机制，为临床上将法舒地尔作为抗白血病药物提供更多基础理论。实验材料与实验方法用法舒地尔以不同浓度对HL-60细胞（人急性早幼粒白血病细胞）和患者白血病细胞处理96小时（分时段24、48、72、96小时）用台盼蓝拒染方法计数活细胞数，以此观察法舒地尔对白血病细胞增殖的抑制作用；HL-60细胞为天津血液病医院馈赠

7、；用法舒地尔以不同浓度对HL-60细胞处理48小时，分时段（6h、12h、24h、48h）利用流式细胞仪器测其凋亡率；用法舒地尔以不同浓度对HL-60细胞处理72小时，利用NBT还原实验计算阳性细胞百分比，利用流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b、CD13；法舒地尔以不同浓度对HL-60细胞处理72小时后利用RT-PCR检测MMP-2、MMP-9mRNA的表达；利用Transwell小室体外构建肿瘤细胞迁移模型，用法舒地尔以不同浓度在Transwell小室上室对HL-60细胞和患者白血病细胞处理12小时后计数Transwe

8、ll小室下室细胞数目，以此观察法舒地尔对白血病细胞迁移的影响。实验结果1.利用台盼蓝拒染的方法监测法舒地尔对HL-60细胞增殖的抑制作用：不同浓度的法舒地尔（25、50、75umol/l）在24、48、72、96小时均能抑制HL-60细胞增殖，其抑制增殖的强度具有时间-浓度依