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时间:2019-03-14
《武汉市部分菜场食品中产志贺毒素大肠杆菌的分布和生物学特征》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
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4、密级UDC学校代码10496硕士学位论文武汉市部分菜场食品中产志贺毒素大肠杆菌的分布和生物学特征DistributionandBiologicalCharacteristicsofSTECinFoodsfromsomeMarketsinWuhan论文作者郑冬冬指导教师李睿教授学科专业生物化学与分子生物学论文提交日期论文答辩日期答辩委员会主席评阅人2015年5月摘要产志贺毒素大肠杆菌(Shigatoxin–producingEscherichiacoli,STEC)是一种重要的食源性致病菌,可引起暴发性流行感染事件,近年来该菌引起人的感染致病事件日益增加。本课题主要研究武汉市售食品中STE
5、C的流行状况,同时对分离株的毒力基因、志贺毒素滴度、生物膜及耐药性等进行鉴定,以确定这些菌株的生物学特征。从22家菜场和超市采集样品161份,进行PCR检测,有35份样品污染有O157型STEC,20份样品污染非O157型STEC,其中4份样品污染有O45型STEC,1份样品污染有O145型STEC,1份污染有O111型STEC。污染了STEC的55份样品中只检出stx1基因的有1份(1.8%),只检出stx2基因的有41份(74.5%),同时检出stx1和stx2基因的有13份(23.6%)。污染O157型STEC的样品有27份eae基因检测结果呈阳性,污染非O157型STEC的样品没
6、有检测出hly基因。综合分析发现,O157型STEC在猪肉样品中的检出率最高;而非O157型STEC在牛肉样品中的检出率最高;同时在禽类样品中也检测出O157型STEC,但未检测出非O157型STEC;鱼肉和蔬菜样品没有检测出STEC。对27份eae基因检测呈阳性的样品通过免疫磁珠收集、血清学鉴定、菌落PCR复筛进行分离。共分离出5株O157菌株。对其毒力基因检测发现,有4株菌携带eae、hly、ehxA基因。EC5.11仅携带stx2基因,其余3株菌还同时携带stx1基因和stx2基因。分离株EC9.102不携带上述毒力基因。除EC9.102仅携带rfbO157基因外,其余四株菌均携带
7、fliCH7和rfbO157基因,说明这四株菌为O157:H7血清型。在Vero细胞毒性试验中,对5株分离株进行Stx毒素检测,结果菌株EC9.102滤液对Vero细胞生长无明显影响,其余4株O157:H7菌均对Vero细胞有明显的毒性。4株菌的毒素滴度有一定差异,其中EC9.101和EC9.12与临4床菌株EC150的毒力相同,菌株的毒素滴度为1×10CD50/mL。采用分型引物对4株O157:H7菌的stx基因亚型进行鉴定。结果
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