柴朴汤对肝郁型哮喘mir-21、pten的表达及嗜酸性粒细胞凋亡的影响

柴朴汤对肝郁型哮喘mir-21、pten的表达及嗜酸性粒细胞凋亡的影响

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1、?分类号R4密级公开UDC610编号10555嚇為#^索硕±学位论文(专业学位)m-柴朴汤对肝郁型哮喘iR21、PTEN的表达及嗜酸性粒细胞调古的影响研究生姓名:刘坤指导教师、职称:戴爱国教授专业学位类别(领域):临床医学研究方向:呼吸病学(支气管哮喘)所在学院:湖南省老年医院二0—五年五月-2榮朴汤对肝郁型哮喘miR1、PTEN的表达及嗜酸性粒细胞调亡的影响论文作者签名:指导教师签名_论文评阅人1:孙畢华

2、教授博导中南大学湘雅王戾院评阅人2:刘志化教授硕导湖南省人民巧院3评阅人;答辩委员会主席:黄信刚教授博导中南大学湘雅二戾院委员:1李柏完教授硕导南华大学附属H睽院委员2:朱黎明教榜硕导湖南省老年睽院委员3:蘭瑞成教授硕导湖南省老年睽院委员4;癖永亮副教榜硕导細南省老年民院委员5:委员6:答辩日期:2015年5月22日南华大学学位论文原创性声明本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研巧工作及取得的研究成果。尽我所

3、知,除了论文中特别加标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研巧成果,也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。■作者签名:厂年月南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读硕(博/硕)±学位期间在导师指导下完成的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有,本论文的研究内容不得W其它。、;学单位的名义发表本人同意南华大

4、学有关保留使用学位论文的规定,即校有权保留学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可W公布学位论文的全部或部分内容,可W采用复印、缩印或其它手段保留学位论文;学校可根据国家或湖南省有关部口规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕±学位论文全文数据库》,并按《中国优秀博硕±学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学》。位论文全文数据库,并通过网络向社会公众提供信息服务对于涉密的学位论文,解密后适用该授权。

5、^k作者签名:导师签名;\柴朴汤对肝郁型哮喘miR-21、PTEN的表达及嗜酸性粒细胞凋亡的影响摘要:研究目的:通过研究柴朴汤对肝郁型哮喘大鼠miR-21、PTEN表达及嗜酸性粒细胞凋亡的影响,从而探讨柴朴汤防治肝郁型哮喘的机制与miR-21、PTEN及嗜酸性粒细胞凋亡之间的关系。研究方法:1)70只雄性SD大鼠随机原则分为肝郁组(n=30)与非肝郁组(n=40),肝郁组大鼠于第1~28天进行慢性不可预见性应激刺激,非肝郁组不做任何处理。造模结束后检测肝郁组与非肝郁组大鼠体重变化、糖水消耗量

6、、血液肾上腺皮质激素(ACTH)含量,评价肝郁型模型。造模成功后将肝郁组与非肝郁组每10只分为一组一共7组,非肝郁组分为对照组、正常中药组、哮喘组、哮喘治疗组,肝郁组分为肝郁哮喘组、肝郁哮喘治疗组、地塞米松组。哮喘组、哮喘治疗组、肝郁哮喘组、肝郁哮喘治疗组、地塞米松组5组采用用卵蛋白(OVA)诱导复制哮喘模型。自雾化致敏大鼠造模开始,每次雾化吸入致敏剂前30min,各组大鼠均予以胃内注药处理。正常中药组、哮喘治疗组、柴朴汤组予以柴朴汤颗粒(每克颗粒含生药18.5g)350mg/kg灌胃;地塞米松组大鼠

7、予以地塞米松1mg/kg灌胃;正常对照组、哮喘模型组、肝郁哮喘组3组大鼠予以等量生理盐水处理。干预结束后,根据各组大鼠的症状及体征进行评分;肺功能测定,小动物呼吸机测定各组大鼠在不同浓度乙酰胆碱激发下测定的气道阻力;苏木素-伊红染色观察各组大鼠气道及肺组织病理改变;涂片法测定各组大鼠支气管肺泡灌洗液中白细胞、嗜酸性粒细胞数,嗜酸性I粒细胞比例;用流式细胞计数测定支气管灌洗液EOS凋亡率;荧光实时定量PCR检测血液及肺组织miR-21水平表达;蛋白质免疫印迹(Western-blot)和RT-PCR检测

8、肺组织表达PTEN及PTENmRNA水平。结果:1、肝郁模型的鉴定:1)体重比较:肝郁组体重286.69±7.36(g)造模结束后较对照组233.46±8.52(g)明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);2)肝郁组糖水消耗量8.41±0.79(ml)造模结束后较对照组19.42±0.86(ml)明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);3)正常对照组血浆ACTH含量709±263(ng/L)造模结束后较肝郁组1768±256(ng/L)明显降

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