咳喘落口服液对哮喘模型小鼠肺组织中嗜酸性粒细胞凋亡及调控因素的影响

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1、咳喘落口服液对哮喘模型小鼠肺组织中嗜酸性粒细胞凋亡及调控因素的影响【摘要】观察咳喘落口服液对哮喘小鼠嗜酸性粒细胞（eosinophil,EOS）凋亡及调控因素的影响，旨在进一步阐明咳喘落抑制气道炎症的机制。方法：56只BALB/c小鼠分为正常组、模型组、咳喘落组和西药(强的松龙)组。除正常对照组外，其余各组小鼠用卵白蛋白和硫酸铝钾致敏激发BALB/c小鼠，复制哮喘模型。在不同时相（末次激发后0h，第3、7和14天）分别采用改良的Giemsa染色法检测各组小鼠肺组织中EOS数量；免疫组化结合图像分析方法检测各组小鼠肺组织中Fas、Fas配体（Fa

2、sligand,FasL）和BclXL表达的情况；采用TdT介导的带生物素dUTP缺口末端标记技术（terminaldeoxynucleotidyltransferasemediatedbiotindUTPnickendlabeling,TUNEL）检测EOS凋亡率。结果：末次激发后第3、7和14天，哮喘模型组小鼠气道炎症明显，以末次激发后第3天最为严重，而咳喘落组、西药组各时相气道组织炎症均明显减轻，EOS数量低于模型组（P<0.05）。咳喘落组末次激发后第3天，其肺组织内FasL、EOSFas阳性面积和凋亡率较模型组升高，差异有

3、统计学意义（P<0.01），且凋亡率达顶峰，而BclXL的阳性面积及EOS数量低于模型组，差异有统计学意义（P<0.05）；末次激发后第7和14天，中药组EOS中Fas阳性面积和Bcl17XL的阳性面积较模型组明显下降（P<0.01）；且第14天，其肺组织中FasL表达和EOS凋亡率均明显下降（P<0.01）。西药阳性对照组的作用与中药治疗组类似。结论：哮喘小鼠存在以EOS浸润为主的气道炎症，同时伴有凋亡受抑和凋亡延迟。咳喘落可以提高炎症早期肺组织EOS凋亡率，可能是通过减少EOS，提高FasL、Fas表达和降低Bc

4、lXL表达实现的。【关键词】支气管哮喘;复方;肺嗜酸性粒细胞增多;细胞凋亡;Fas配体;Fas;BclXL;小鼠　　Objective:ToexplorethemechanismofKechuanluooralliquid,acompoundChineseherbalmedicine,ininhibitingallergicairwayinflammationbyobservingtheeffectsofKechuanluooneosinophil(EOS)apoptosisanditsregulationfactorsinasthmati

5、cmice.Methods:FiftysixBALB/cmicewererandomlydividedintonormalcontrolgroup(n=16),untreatedgroup(n=16),Westernmedicinegroup(n=12)andKechuanluogroup(n=12).Exceptforthemiceinnormalcontrolgroup,asthmawasinducedinBALB/cmicebyusingovalbumin(OVA)andpotassiumaluminiumsulfate.Themice

6、wereintragastricallyadministeredwithnormalsaline,Kechuanluo(30ml/kgdaily)andprednisolonetablets(10mg/kgdaily)respectivelyfortwoweeks.At0hour,the3rd,7thand14thdayaftertheendofOVAsensitization,theEOSsoflungtissueswerecountedbyimprovedGiemsastainingmethod;immunohistochemicalme

7、thodandimageanalysis17wereusedtodetecttheexpressionsofFas,FasLandBclXLintheEOSsinthefourgroups;andapoptoticratesoftheEOSsinthelungtissuesofasthmaticmiceweredetectedbyterminaldeoxynucleotidyltransferasemediatedbiotindUTPnickendlabeling(TUNEL)technique.Results:Comparedwitht

8、heuntreatedgroup,airwayinflammationsofthemiceintheKechualuogroupandWesternm