柠檬醛对鸡胚唇部组织bambi时空表达的影响

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1、曲庭种夫緣ａｎｘｉＭｅｄｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔＧｕｇｉｙ学号：２０１２２０１９５硕±学位论亥梓樣醇对鸡胚唇部组织Ｂ乂ＭＢＩ时空表达的款响陀杨娟：口导师姓名：孙晋虎专业名称腔临床医学申请学位类型：科学学位答辩委员会主席：张志愿答辩委员会委员：俞光岩黄洪章周健周诺二〇—五年五月原剑性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加Ｌ乂标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含获得广西医科大学或其他

2、教育机构的学位或证书使用过一的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均邑在论文中作了明确的说明并表示谢意。占，。学位论文作者签笔：犯椒签字曰期从／年月曰学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定：，即在校期间论文的知识产权属广西医科大学。学校有权保存论文的电子和纸质文档，可Ｌ乂借閑或上网公布本论文的部分或全部内容，可Ｌ乂采用影印、复印或其它手段保存、汇编本论文，学校可Ｌ乂向国家有关机关或机构送交论文的电子和纸质文档，允许论文被查阅和借閑。同意广西医科大学可レ乂用不同方式在不同

3、媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。保密论文在解密后遵守此规定。Ｉ学位论文作者签養：庭故媽导师签字：。Ｉ曰签字曰期。签字曰期：年ｔ月：年６月／曰个人简历基本情况姓名；陀杨娟性别：女民族；汉族出生年月：１９８８年８月籍贯：广西贺州政治面貌：中共党员学习工作经历２００－？？？．７０９２０１２０６广西医科大学口腔医学院口腔医学本科２０１２０９至今？广西医科大学？口腔医学院．曰脸领面外科学．硕±研究生期间科研经历２０１２年２２０１４１月至年１２月参与课题；唇裂动物模型的建立及伪受体ＢＡＭＢＩ

4、在唇裂发生中的作用；国家自然科学基金项目，编号３１０６０１６７；参与唇裂动物模型的建立及伪受体ＢＡＭＢＩ表达的检测，结果分析及论文撰写。目录一、中文摘要１二、英文摘要３Ｓ、前言８四、论文正文１１一ＡＭＢ１、第部分地高辛标记鸡胚ＢＩ基因ＲＮＡ探针的制备（１）材稱１１（２）实验方法１４（３）结果２５２９（４）讨论（５）小结３１２二、第部分整巧原位杂交检测巧樣酸对鸡化唇部组织ＢＡＭＢＩ表达的影响（１）材料３２（２）实验方法％（３）结果３９（４）讨论４４（５

5、）小结４８４９３、结论４、问题和展望５０５、参考文献５１五、中英文缩略词５７六、综述５８屯６８、致谢八、攻读学位期间发表的学术论文６９梓樣醇对鸡胚唇部组织ＢＡＭＢＩ时空表达的影响２０１２级硕±学位论文巧樣酸对鸡腥唇部组织ＢＡＭＢＩ时空表达的影响摘要目的通过将携带有梓樣酵的载体微珠植入到正常发育的２０期鸡化右侧的鼻窝外胚层组织上，局部诱发鸡胚唇裂崎形，检测巧樣醒对鸡胚唇部组织ＢＡＭＢＩ时空表达的影响，探讨并阐明ＢＡＭＢＩ对鸡化唇部组织发育及唇畴形缺损形成过程中的作用一，为进步探索人类

6、唇部发育和唇裂的发生机制奠定基础，为人类唇裂的早期发现及早期治疗提供理论依据。方法１、建立稳定的鸡胚唇裂模型通过本课题组的前期摸索，梓樣醇诱发崎形的最佳浓度为０．６ｇ／ｍｌ，已经成功建立了稳定的鸡胚唇裂动物模型。本研究同样运用〇．６ｇ／ｍｌ的梓樣酸浓度，将携带有最佳浓度巧樣醒的载体微珠植入到正常发育的２０期鸡胚右侧的鼻窝外化层组织上，复制稳定的鸡胚唇裂动物模型。２、地高辛标记鸡胚ＢＡＭＢＩ基因ＲＮＡ探针的制备２４期的新鲜鸡胚取出－将解化至，提总ＲＮＡ，用ＲＴＰＣＲ的方法得到ＢＡＭＢＩ的ｃＤＮＡ－－，将回收的ｃＤＮＡ插

7、入到ＰＧＥＭＴ质粒载体中ＢＡＭＢＩ的ＰＧＥＭＴ，得到携带有重组质粒，用限制性内切酶蒋重组质粒线性化，利用质粒上的ＳＰ６和Ｔ７启动子，在ＳＰ６ＲＮＡ聚合酶和Ｔ７聚合酶的作用下，分别体外转录合成地高辛标记的ＢＡＭＢＩ基因的ＲＮＡ反义探针和正义探针。３、整胚原位杂交检测巧樣酵对鸡胚唇部组织ＢＡＭＢＩ时空表达的影响将１８０只正常发育的２０期鸡化随机分成正常空白组、ＤＭＳ０阴性对照组、反义探针实验组和正义探针实验组４组，每组４０只。正常空白组：同期正常发育未经任何处理的鸡化；ＤＭＳＯ阴性对照组；植入携带有ＤＭＳ０的微珠；反１梓樣醒

8、对鸡胚唇部组织ＢＡＭＢＩ时空表达的影响２０１２级硕±学位论文