枯茗醛对alternaria alternata的抑制及其部分作用机理

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1、摘要I分类号密级UDC单位代码10733甘肃农业大学硕士学位论文枯茗醛对Alternariaalternata的抑制及其部分作用机理CuminalInhibitsGrowthofAlternariaalternataandItsAnitifungalMechanism沈科萍指导教师姓名毕阳教授（甘肃农业大学兰州730070）张忠副教授（甘肃农业大学兰州730070）学科专业名称食品科学研究方向采后生物学与技术论文答辩日期2015年5月29日学位授予日期2015年6月答辩委员会主席赵萍教授评阅人王俊龙副教授王婧副教授2015年6月摘要I摘要枯茗醛是孜然精油的重要组分成

2、分之一，互隔交链孢(Alternariaalternata)是常见的果蔬采后病原真菌，但枯茗醛对A.alternata的抑制效果及其作用机理尚未见报道。本研究采用最小抑菌浓度、抑菌圈、孢子萌发、动态抑菌等方法对枯茗醛对A.alternata的抑菌活性进行了筛选；借助扫描和透射电镜观察了处理后菌丝的形态变化；定量了处理菌体细胞膜麦角固醇和丙二醛含量；分析了处理菌体线粒体膜电位及活性氧含量的变化。结果表明：1.体外试验表明，枯茗醛对A.alternata的菌落生长具有明显的抑制作用，其对A.alternata的MIC值为6.25mL/L，可以显著抑制菌落生长以及孢子萌发

3、。体内试验结果显示，枯茗醛能够抑制损伤接种A.alternata早酥梨黑斑病病斑直径的扩展，以12.5mL/L的处理效果最好，其病斑直径仅为对照的三分之一。2.SEM和TEM观察的结果显示，枯茗醛处理后的A.alternata菌体形态以及超微结构发生了明显的改变，菌丝体表面出现畸形甚至扭曲断裂，细胞器结构模糊不清且形状不规则；细胞壁和细胞膜厚度粗糙不均匀，细胞外围出现连续的凸起，细胞内的物质大量外漏，菌丝体内部结构破坏明显，有空腔形成。3.不同浓度枯茗醛处理可损伤A.alternata孢子细胞膜的完整性，降低细胞膜上麦角固醇的含量，提高丙二醛的含量，从而导致体内活性

4、氧的积累；外源抗氧化剂Cys不仅可以明显地抑制枯茗醛诱导的菌体线粒体内活性氧的积累，而且可以较强的减轻枯茗醛的抑菌活性。4.不同浓度枯茗醛处理导致了A.alternata孢子线粒体膜电位的升高，抑制了线粒体脱氢酶和ATPase活性，同时导致了ATP合成减少。综上所述，枯茗醛对A.alternata具有较强的抑菌活性，其抑菌机理与其破坏细胞膜的完整性，降低细胞膜上麦角固醇的含量，提高胞内MDA的含量、线粒体膜电位以及活性氧含量，抑制能量生成密切相关。关键词：枯茗醛，互隔铰链孢，抑菌活性，超微结构，MMP，ATPase，ROSII枯茗醛对A.alternata的抑制及其

5、部分作用机理ABSTRACTCuminalisoneofthemostcomponentsofcuminessentialoil.Alternariaalternataisoneofimportantpathogensthatcausespre-andpost-harvestlossesathighfrequencyinmanycrops,whichcausestheoccurrenceofapplepears,apple,pepper,citrus,jujube,gingko,mango,apricotandpersimmonblackspot.Therewere

6、littlereportsavailableontheunderlyingmechanismofantifungalfunctionofcuminalagainstA.alternata.Themethodsofbiochemistry,histochemical,scaningelectronmicroscopeandFACScanflowcytometerwereusedforinvestigatingantifungalactivityanditspartialmechanismofcuminal.Theaimsofthisstudyweretoinvesti

7、gatetheeffectsofcuminalonsporegerminationandinvitrohyphalbiomassinA.alternata;toobservethemorphologicalmodificationofchanging;andtoevaluateeffectsofcuminalininducingcellmembranedisruptionandoxidationoflipidsandtriggeringfungalcelldeathspecificallythroughmitochondrialdysfunction-induc