长牡蛎dna甲基化研究

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1、＠沁义＊缓）寸禾ＯＣＥＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＣＨＩＮＡ博±学位论文ＤＯＣＴＯ民ＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ．论文趣目：长牡贿ＤＮＡ甲基化研究ＤＮＡｍｅ化ｌａｔｉｏｎｓＵｉｄｉ巧ｏｎ化ｅＰａｃｉｆｉｃｏ巧ｅｒｙｙ英文题目：Ｃｒａｓｓｏｓｔｒｅａｉａｓｇｇ作者：姜群指导教师：李琪教授学位类别：学术学位专业名称：水产养殖研究方向：水产养殖繁育生物学１７＾解，巧￡．？ｒ－－？二＾？－二二Ｌ

2、＿—／我敬爱的导师和擎ｋ的家人ＰＸ及所有帮助和关心我的老师、同学和朋友—姜群长牡妨ＤＮＡ甲基化研究义学位论文答辩日期：指导教师签字：＾＞之使ｔ、答辩委员会成员签字：考心〇＾ｒ＾｜独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的，论文中不包含其，除了文中特别加研充成果。据我所知１＾标注和致谢的地方外他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得（注＝如没有其他需要特别声明的，本栏可空）或其他教育机构的学位或证书使用过的材料一。与我同工作的同

3、志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期；年６月日姜平＾学位论文版权使用授巧书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，并同意Ｗ下事项：１、学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。２、学校可将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采＂用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学中＂ＮＫ国学术期刊光盘版电子杂志化用于出版和编入ＣＩ《中国知识资源总库》，

4、（）授权中国科学技术信息研巧所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签字：签字曰期：年６月曰签字曰期：年月曰＞反＾Ｉｙ长牡骗ＤＮＡ甲基化研究摘要表观遗传学是指在ＤＮＡ序列不发生改变的情况下基因表达发生的可遗传的一ＤＮＡ甲基，改变，化是目前研究最为成熟的种表观遗传修饰与基因组防御、基因表这调控密切相关。目前ＤＮＡ甲基化的研究主要集中在哺乳动物及植物中，水产动物的研巧相对匿乏。长牡颇（ＣＶｗｗＷｒｅｏｇ哈ＸＳ）又名太平

5、洋牡顿，是我国乃至世界上产量最大的海产经济贝类，因其生活于环境多变的潮间带并且具有复杂的生物学特征而成为水产动物研究的模式生物，对长化贿的ＤＮＡ甲基化进行研究有助于了解水产动物ＤＮＡ甲基化的分子机制和功能，解析水产动物复杂生物学特征及对环境适应性的调控机理。本研究针对长化贿开展了ＤＮＡ甲基化的基础研究，分析了ＤＮＡ甲基化的遗传模式、组织特异性及Ｈ倍体和选育群体中ＤＮＡ甲基化的变异，期为后期相关研究提供理论基础。１、长化蜗ＤＮＡ甲基化的遗传模式－ＭＳＡＰ）方法采用巧光标记的甲基化敏感扩增多态性

6、（Ｆ，研究长牡贩亲本甲基化和非甲基化位点在子代的分离，检测ＤＮＡ甲基化在亲子代间的遗传模式。结果发现．６％，长牡顿９０的亲本甲基化位点遵循孟德尔定律稳定遗传给子代，甲基化位点较非甲基化位点更加偏离孟德尔分离比，与亲本相比，子代存在２２个去甲基化位点，７个超甲基化位点和３０个从头甲基化位点。２、ＤＮＡ甲基化在长牡顿不同姐织中的分化Ｆ－ＭＳＡＰ方法对采用１０只野生长牡蜗６个组织（鲍、外套膜、闭壳肌、唇瓣、性腺、消化盲囊）的基因组甲基化进行检测。结果发现，长牡顿不同组织间ＤＮＡ甲基化水平存在差异、，消

7、化盲囊唇瓣、闭売肌组织的甲基化水平较髙，其中消化盲囊与鲍和外套膜组织的甲基化水平差异显著，其他组织间差异并不显著，。长牡顿中存在组织特异性和非组织特异性甲基化位点然而由于牡顿杂合度高一，个体之间差异较大，未发现１０个个体致存在的组织特异性／非组织特异性甲基化位点。Ｉ３ＮＡ甲基、长牡颇Ｈ倍体基因姐Ｄ化研究ＢＦ－采用细胞松弛素诱导产生长牡蜗二倍体和Ｈ倍体家系，采用ＭＳＡＰ方法对二倍体和Ｈ倍体的闭壳肌和性腺组织的ＤＮＡ甲基化进行分析。结果发现，二倍体与Ｈ倍体长牡蜗整体ＤＮＡ甲基化水平在闭壳肌和性腺

8、组织中都不存在差异，仅存在少量倍性特异性位点，Ｈ倍体的。通过与亲本基因型比较发现甲基化位点和未甲基化位点的变异率都高于二倍体。基于主成分分析方法对二倍体和Ｈ倍体的闭壳肌及性腺组织的表观遗传结构分析显示，长牡颇不同倍性及不同姐织么间的表观遗传结构存在较大差异，这