软骨内骨化过程中的血管侵入和软骨细胞的分化

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1、武汉体育学院硕士学位论文乾骨内骨化过程中的^歎骨细胞的分化研究生：.............翟延东导师：...........王松教授专业：运动医学研究方向：运动损伤与传统手法治疗2015年5月武汉体育学院硕士学位论文论文题目：软骨内骨化过程中的血管侵入和软骨细胞的分化研究生：翟延东________________导师：王松教授___________专业：_________运动医学_______________研究方向：运动损伤与传统手法治疗2015年5月学校代号：10522分类号：学号：1052222012071武汉体育学院硕士学位论文软骨内骨化过程中的血管

2、侵入和软骨细胞的分化申请人姓名：翟延东指导教师姓名、职称：王松、教授申请学位类别：医学硕士学科专业名称：运动医学研究方向：运动损伤与传统手法治疗论文答辩日期：2015年^月&曰学位授予单位：武汉体育学院学位授予日期：年月曰答辩委员会主席：_MikVascularinvasionandthedifferentiationofthecartilagecellsintheprocessofendochondralossificationAThesisSubmittedfortheDegreeofMasterCandidate：ZhaiYandongSuperviso

3、r：Porf.WangSongWuhanInstituteofPhysicalEducation武汉体育学院学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人声明，所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得武汉体育学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。论文作者签名：日期：>丨6一年学位论文使用授权说明本人完全了解武汉体育学院有关保留、使用学位论文的规定

4、，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权武汉体育学院可以将本学位论文的全部内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存或汇编本学位论文。同时授权经武汉体育学院认可的国家有关机构或论文数据库使用或收录本学位论文，并向社会公众提供信息服务。作者签名:指导教师签名：^曰期：2_£?/夕.摘要研究目的：在骨发育和骨折愈合中血管新生和骨形成是相耦合的。尽管人们已早有了解，但具体关系还没有深入的探究。本研究通过检测CD31、Ⅱ型胶原、Fas在软骨内骨化过程中的表达变化，探讨血管侵入和软骨骨化的关系

5、，以及软骨细胞的退变去向的生物学机制。研究方法：取1到19天内奇数天小鼠双侧股骨，断颈法处死，常规包埋，固定，切片。采用HE染色法观察软骨的形态学变化和血管侵入情况；采用免疫组织化学方法观察CD31、Ⅱ型胶原蛋白、Fas的表达情况；采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测CD31mRNA、Ⅱ型胶原mRNA的表达情况。研究结果：HE染色发现，前5天内血管侵入较少，7到13天血管侵入大量增加，15到19天内，鼠股骨内的软骨基质开始钙化，血管减少。免疫组化染色结果发现：CD31主要在肥大软骨细胞和成骨区内表达；Ⅱ型胶原蛋白主要在软骨增生期和肥大软骨细胞内表达；

6、Fas主要在肥大软骨细胞和成骨区内表达。RT-PCR结果发现：CD31mRNA、Ⅱ型胶原mRNA在1到19天的仔鼠股骨中均有表达。随着骨发育的加快，血管侵入增多，CD31mRNA的表达均随日龄的增加而增加，骨发育进程减缓，CD31mRNA的表达下降。CD31mRNA的表达的峰值出现在第13天。Ⅱ型胶原mRNA的表达的峰值出现在第17天。研究结论：1）骨骺板生长区和次级骨化中心具有不同的成骨方式，骨次级骨化中心软骨细胞无增生期分化。股骨内骨化过程中，血管侵入与骨发育相互协调，共同促进软骨内骨化；2）在骺软骨板的关节方向，存在一个骨化面，形成并列骨板；3）肥大软骨

7、细胞不是终末细胞，具有内皮表型，并可能转分化为血管内皮细胞，参与血管的构建，促进血管的入侵。关键词：软骨内骨化；CD31；Ⅱ型胶原；FAS；血管入侵IAbstractObjective：Angiogenesisinbonegrowthandfracturehealingandboneformationarecoupled.Althoughpeoplehavehadtounderstand,butthereisnoin-depthstudyofthespecificrelationship.Inthisstudy,wedetectingtheexpression

8、ofCD31,collagenⅡand