血管内皮生长因子对猪着床前早期胚胎体外发育的影响

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3、invitroDevelopmentofPigEmbryosPostgraduatecandidate:GaoYangAcademicsupervisors:Prof.ZhangYunhaiCo-supervisor:Prof.ZhangXiaorongCollegeofAnimalScienceandTechnology,AnhuiAgriculturalUniversity,Hefei,230036Anhui,P.R.ChinaJune,2015独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研巧成果。尽我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方

4、外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研巧成果，也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。．研巧生签名：細时间：＞＆年＾月户石关于论文使用授权的说明本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定：，即学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意安徽农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。保密的学位论文在解密后应遵守此协议（）

5、：：研究生签名时间Ｗ姑／如Ａ一＾第导师签名：时间；年月日本项研究受下列基金资助1.国家自然科学基金项目(批准号：31272442)2.转基因生物新品种培育科技重大专项(批准号：2014ZX08006-01B)3.安徽省现代生猪产业技术体系SUPPORTEDBY1.NationalNaturalScienceFoundationofChina(No.31272442)2.NationalTransgenicOrganismsBreedingMajorProject(No.2014ZX08006-01B）3.AnhuiProvincialModernSwine

6、IndustryTechnologyResearchSystem摘要胚胎培养基的成分是影响动物胚胎质量和发育命运的关键因素。与体内自然的发育环境相比，体外培养基支持胚胎发育的效率和质量还不够理想。在培养基中添加生长因子可以改善卵母细胞的培养环境、促进胞质同步成熟，提高胚胎发育的质量。血管内皮生长因子具有促进内皮细胞增生、促进细胞迁徙和提高血管通透性等生物学作用，研究表明血管内皮生长因子与猪着床前早期胚胎体外发育有密切的相关性，但所得结果却不相一致，这主要是因为培养基中含有的血清等成分未知物质对胚胎早期的生长发育具有较大的干扰。本研究首次采用了成分明确的化学限定培养基来研究VEG

7、F对猪着床前早期胚胎体外发育的真实影响，再通过细胞凋亡染色技术探究VEGF对猪胚胎发育质量的影响及作用机制，从而准确的表达外源性添加生长因子对其发育的真实影响。具体实验及结果如下：实验一旨在通过向限定性成熟培养基中添加VEGF(对照组：0ng/mL；实验组：5、25、50ng/mL)，研究其对猪卵母细胞(颗粒细胞包裹≥3层)成熟及其孤雌胚胎后期发育的影响。结果表明，添加VEGF对猪卵丘细胞扩散、卵母细胞成熟、及其孤雌胚胎的卵裂率、成熟率、囊胚总细胞数、凋亡细胞数和凋亡指数均没有显著影响。实验