活性氧（ros）对兔早期胚胎体外发育影响

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2、ｅｌｏｐｍｅｎｔＩｌＩ—活性氧（ＲＯＳ）对兔早期胚胎体外发育的影响一绪论第一章绪论近年来，体外培养的着床前胚胎广泛用于体外受精、胚胎移植、胚胎分割、核移植、转基因动物的生产，以及胚胎干细胞系的建立等研究，并越来越受到研究者们的重视。自从１９１３年ｇｒａｃｈｅｔ对兔囊胚进行体外培养实验以来，二十世纪５０年代后期研究者们开始研究胚胎体外培养方法，并一直受到人们的重视，尤其近年来更为甚。但迄今为止胚胎体外培养结果还是令人不满意。目前对哺乳动物体外胚胎培养的条件知道得还不充分，体外完全模拟子宫和输卵管环境也很困难。因此，建立稳定、可靠的哺乳动物胚胎体外培养系统是必要的。活性氧是自然界普遍存

3、在的，是从氧衍生出来的自由基及其产物。活性氧可分为自由基和非自由基，其中超氧阴离子０厂、羟自由基’０Ｈ、超氧阴离子质子化产物ＯＨ。一、烷氧基Ｒｏ。、烷过氧基Ｒ０２。、铁酰血红素蛋白基‘Ｘ－ｆＦｅ”＝Ｏ］属自由基；过氧化氢如魄、氢过氧化物（ＲＯＯＨ）、单线态氧（‘Ｏ？）、次卤酸（ｔｔＯＸ）和臭氧（Ｏ。）属非自由基。近年来又把一氧化氮（ＮＯ。）也都列为活性氧。１．１活性氧（ＲＯＳ）的产生细胞正常代谢过程中的ＲＯＳ主要在线粒体呼吸链部位由单电子传递给氧而产生。３。实验已经证明了线粒体是细胞中产生活性氧的一个重要部位。其产生的速率主要受线粒体跨膜电位△ｌＩｒｍ的控制。Ｃｈａｎｃｅ”，等证明

4、在正常生理情况下，约有２％的氧消耗子线粒体活性氧的产生，生成活性氧的前体是超氧阴离子和过氧化氢，它们是呼吸链底物端漏出的电子引起氧分子单电子还原而生成的。Ｘｕｕ，等证明呼吸链氧端细胞色素ｃ可以漏出电子还原双氧水，这对呼吸链底物端电子漏产生的超氧自由基和双氧水起到了部分清除的作用，使呼吸链成为一个自主防御的抗氧化系统。实际上呼吸链底物端电子漏和氧端电子漏共同构建了超氧自由基的代谢路径，提示线粒体中存在着超氧自由基代谢过程。主要产生活性氧的催化酶有黄嘌呤氧化酶、髓过氧化物酶、还原性辅酶１Ｉ氧化酶、蛋白激酶、～氧化氮合酶、醛氧化酶、二氢乳清酸脱氢酶、黄素蛋白脱氢酶、色氨酸双氧酶等。目前研

5、究较多的是产生毡一的黄嘌岭氧化酶。另外，一些小分子如：多巴胺、活性氧（ＲＯＳ）对免早期胚胎体外发育的影响一绪论肾上腺索、黄素、对苯二酚等氧化时也可产生胞内ＲＯＳ。当生物体受到外界刺激时会促进活性氧的产生。这些外界因素包括射线、离压氧，香烟烟雾、空气污染、金属离子、抗癌药、抗生豢、杀虫剂、麻醉药等药物或化学试剂等。朱茂祥等利用不同剂量的Ｙ射线照射细胞后与未经ｙ射线照射的细胞相比细胞内的活性氧有明显的增加“１。Ｈｕｃｋ—ＣｈａｎＫｗｏｎ等报道胚胎在２０％氧的条件下培养与在５％氧的条件下相比活性氧的浓度有明显的提高吲。金属离子如铅。１、铬”３、钒。１等均能诱发细胞内部过氧化氢的增加。氧

6、在细胞中氧化其他物质的过程中，自身要进行单电子还原，产生出三种活性氧，即超氧阴离子自由基，过氧化氢和羟自由基，这些活性氧又能继发的产生其他更多种类的活性氧，它们与关键性生物分子如蛋白质、核酸、脂肪和碳水化合物发生反应，造成较大的变化，改变生物多种功能，甚至引起疾病或死亡。为了生存，生物必须设法防止它的有害作用，因此在长期的进化过程中，生物体发展出了一整套十分复杂的防御系统。１）细胞色素氧化酶使氧直接还原成水。２）抗氧化酶：如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶等。３）能清除自由基，或者能使一个有毒自由基变成另一个毒性较低的清除剂，也常称为抗氧化剂。清除剂有内源性清除剂、外

7、源性清除剂和间接性清除剂。内源性清除剂有维生素Ｃ、尿酸、维生素Ｅ”１、胆红素、类胡萝１－素、胆固醇、褪黑激素、硫辛酸还有其他肾上腺素、胰岛素、视黄素等；外源性清除剂有色氨酸、Ｄｂ蛋氨酸、ＤＬ广组氨酸、烟酰胺、抗坏血酸、Ｌ一半胱氨酸、柠檬酸钠、谷胱甘肽、甘氨酸等。不同蔬菜、水果间清除活性氧的能力差异显著，在煮沸前，缸豆、韭菜、茄子的抗氧化活性较高，而黄瓜、番茄的抗氧化活性最低：沸后以葡萄、香蕉、茄子、桃的抗氧化活性较高，而柿子椒、黄瓜、番茄、四季豆、芹菜的抗氧化活性最低