低氧对水牛卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响

《低氧对水牛卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、巧女学化论义低氧对水牛卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响’．‘．，刘晓淋■ｐ＾廣Ｉ巧乂榮二〇—五年六月’：．＇＊＇？Ｎ？？．，，分类号Ｓ８２３乂密级公开ＵＤＣ编号Ｂ０１７硕±学位论文低氧对水牛卵母细胞体外成熟及早期化胎发育的影响刘晓淋学科专业动物溃传育种与繁殖指导教师石德顺研究员陆凤花研究员论支答辩日期２０１５年５月２６日授予日期答辩委员会主席卢克焕教授广西大学学位论文原创性和使用授权声明本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究

2、所取得的研究成果。除已特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料一。与我同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权，即ｔ学校有权保存并向国家有关部口或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇

3、编学位论文。本学位论文属于：□保密，在年解密后适用授权。＼／不保密。＂＂（请在Ｗ上相应方框内打Ｖ）论文作者签名：或艇聲日期：ｉ指导教师签名日觀、〇６／作者联系电话：电子邮箱：低ｆｔ对水牛卵母细胞体外成熟及早期巧胎发育的影响巧要卵母细胞体外成熟（虹ＶｉｔｒｏＭａｔｕｒａｔｉｏｎ，ＩＶＭ）和胚胎体外培养（虹ＶｉｔｒｏＣｕｌｔｕｒｅ，ＩＶＣ）是巧胎体外生产的关键技术环节。近年来，虽然二者均已取得了长足进展，但体外生产的胜胎发育潜力仍较体内巧胎低。本研巧旨在研巧低氧分压对水牛卵母细胞体外成熟与早期胚胎体外发育的影响，

4、同时初步探讨低氧诱导因子（ＨｙｐｏｘｉａＩｎｄｕｃｉｂｌｅＦａｃｔｏｒ，ＨＩＦ）通过糖代谢途径对水牛卵母细胞体外成熟和早期巧胎体外发育影响的分子机制，［＾＾期通过模拟体内卵母细胞成熟和胚胎发育的理化环境来优化卵母细胞和早期巧胎体外培养体系中的气相环境，从而提髙水牛卵母细胞体外成熟和脏胎体外培养的效率。首先研巧了低氧分压对水牛卵母细胞体外成熟的影响，并初步探讨了低氧分压通过ＨＩＦ调节的低氧通路及糖代谢影响水牛卵母细胞体外成熟的－Ｏｏｃｅｏｍ作用机制。结果显示：水牛卵冠丘复合物（ＣｕｍｕｌｕｓｙｔＣｐｌｅｘｅｓ，ＣＯＣｓ）在不同低氧

5、分压（２％〇２、３．５％〇２、５％〇２、６．５％０２）环境中体外成熟培养时，相对于常氧（２０％〇２）姐，５％〇２和６．５％〇姐对卵母细胞的成２ｏｏ熟率无显著影响（５０．７３％ｖｓ５５．３１％，４９．５８／ｏｖｓ５５．３１％，户＞０．０５），而２／ｏＯ２和３．５％〇组卵巧细胞的成熟率均显著降低（２１．２２％ＶＳ５５．３１％，２９．７１％ＶＳ２〇〇％〇Ｗ．３１％，戶＜０．０５）；与常氧（２０／〇〇２）组相比，２％〇２、３．５／〇〇２、５２姐ＣＯＣｓ卵丘细胞扩展指数显著增高（２．８４ＶＳ２．７０，２．挑ＶＳ２．７０，２．８９ＶＳ２．７０

6、，Ｉ尸＜０．０５），而６．５％０组对ＣＯＣｓ卵丘细胞扩展指数无显著影响（２．７４ｖｓ２．７０，２〇〇戶＞０．０５）。水牛ＣＯＣｓ在５／〇〇２和２０／〇〇２条件下体外成熟培养后进行体外受精（ＩｎＶｉｔｒｏＦｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ，ｒＶＦ），获得的胚胎在２０％〇２中体外培养，结果发现：与常氧（２０％〇２）组相比，ＣＯＣｓ在低氧（５％〇）条件下ＩＶＭ组２－ｃｅ能显著提髙其ＩＶＦ早期胚胎的８ｌｌ分裂率和囊巧发育率（４４．８８％ＶＳ〇〇Ｈ％．４７／〇，％．８１／〇ｖｓｌ５．６０％，戶＜０．０５）。对ＩＦｌａ和ＨＩＦ２ａ进行免疫巧光

7、检测结果发现：在ＩＶＭ前水牛ＣＯＣｓ的卵豆细胞及在不同氧分压（５％〇２、２０％〇２）条件下ＩＶＭ后的卵豆细胞上均有ＨＩＦｌａ和ＨＩＦ２ａ的表起而在ＩＶＭＨ一后的卵母细胞中ＩＦｌａ均有表达，ＨＩＦ２ａ几乎不表达。进步进行实时巧ＰＣＲｅａ－－光定量（ＲｌｔｉｍｅｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲ，ＰＣＲ）分析，结果显示；在低ＱＱ氧（５％〇２）环境中体外成熟培养水牛ＣＯＣｓ，显著上调了ＣＯＣｓ中卵丘细胞ＨＩＦｌａ、ＨＩＦ２ａ、ＦＳＨ的受体（ＦＳＨＲ）、ＩＧＦ１的受体（ＩＧＦ化）、Ｆ０Ｘ０１、ＶＥ