血管内皮生长因子对水牛卵母细胞体外受精的影响

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1、分类号UDCS8胡，8弓硕士学位论文密级卑血管内皮生长因子对水牛卵母细胞体外受精的影响蒋丽学科专业动物选笾直弛墨鳘殖指导教师韭明教援论文答辩日期塑!!：≤!!学位授予日期塑!!：笪：塑答辩委员会主席丕虚型l鱼广西大学学位论文原创性和使用授权声明本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除已特别加以标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说

2、明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有权保存并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于：口保密，在年解密后适用授权。1日不保密。(请在以上相应方框内打“√”)论文作者签名：葫纨嗍洲点厂指导教师签名：舯日期询J；、厶r作者联系电话：(g≯7r87午够7眵电子邮箱：j＼／孕曾I}订圆，红m

3、血管内皮生长因子对水牛卵母细胞体外受精的影响血管内皮生长因子对水牛卯母细胞体外受精的影响摘要在培养液中添加各种生长因子常被用于优化哺乳动物卵母细胞体外受精培养体系。研究表明，血管内皮生长因子(VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF)支持动物配子的发生、生长和发育，对动物卵母细胞体外受精有积极影响。本研究探讨了VEGF对水牛卵母细胞体外成熟、受精和早期胚胎发育的影响，旨在优化水牛卵母细胞体外受精培养体系，进一步提高水牛体外胚胎生产效率。本研究包括三个试验。试验一，检验卵丘细胞对水牛卵母细胞体外受精

4、的影响，研究胞质轻微变形的受精卵的发育潜能，并初步试验VEGF对水牛配子发育潜能的影响。结果发现：(1)卵丘细胞去除组受精卵的卵裂率和囊胚率极显著高于保留组(55．14％、20．38％VS．21．44％、3．68％，P<0．01)；(2)细胞质轻微变形的受精卵卵裂率和囊胚率略高于细胞质形态正常组，但差异均不显著(59．96％、20．13％VS．48．59％、18．86％，P>0．05)；(3)卵母细胞成熟培养液中添加10ng／mLVEGF时，受精卵的卵裂率显著高于对照组(0ng／mLVEGF)(54．36％VS．41．84％，P

5、<0．05)；受精液中添加10ng／mLVEGF时，受精卵的卵裂率极显著高于对照组(64．28％VS．43．40％，P<0．01)。以上结果表明：(1)水牛成熟卵母细胞去除卵丘细胞的体外受精效果较好；(2)细胞质轻微变形的受精卵仍具有较好的发育潜能；(3)VEGF台g提高水牛卵母细胞的发育潜能和精子的受精能力。血管内皮生长因子对水牛卵母细胞体外受精的影响试验二，探讨不同浓度的VEGF(O、1、10、100ng／mL)对水牛卵母细胞体外成熟的影响。结果发现：(1)各处理组卵丘扩展指数均高于对照组，但各组间差异不显著(2．83、2．

6、68、2．65VS．2．61，P>0．05)；(2)10ng／mLVEGF处理组的成熟率显著高于对照组(72．30％VS．57．30％．P<0．05)；1n∥mL和100nNmL组的成熟率也高于对照组，但差异不显著(67．18％、60．58％VS．57．30％，P>0．05)；(3)各处理组的卵裂率均高于对照组，其中10n咖L组卵裂率显著高于1n∥mL组和对照组(53．27％VS．41．60％、40．97％，P<0．05)。以上结果表明：(1)VEGF对水牛卵母细胞体外成熟有积极影响；(2)VEGF不仅能促进水牛卵母细胞的核成熟

7、，还能提高卵母细胞的发育潜能。试验三，探讨在受精液中添加不同浓度的VEGF(O、1、10、100nNmL)对水牛精子受精能力的影响。结果显示，10ng／mL和100n∥mLVEGF处理组的卵裂率均极显著高于对照组(63．04％、56．26％VS．41．92％，P<0．01)，ln∥mL组的卵裂率也显著高于对照组(55．16％VS．41．92％，P<0．05)；10nNmL组的囊胚率显著高于对照组(32．62％VS．17．00％，P<0．05)。在前期研究结果的基础上，同时在成熟培养液和受精液中添加10n咖LVEGF，研究其对水牛

8、卵母细胞体外受精胚胎发育的影响，处理组的卵裂率和囊胚率均极显著高于对照组(64．28％、27．22％VS．43．40％、19．02％，P<0．01)，且处理组的囊胚细胞数显著高于对照组(106．83VS．89．50，P<0．05)。以上结果表明，VEGF能促进水