致病疫霉pi-pipk-d8功能的研究与分析

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1、分粪号Ｑ７１学校代码１０１２９ＵＰＣ５７７学号２０１２２１Ｉ０２Ｉ—Ａ赛考袭嗦乂爭硕±学位论文‘－＾－致病疫霉Ａ／ｖ／／ｒｚｗ功能的研究与分析Ｓ－－ｔｕｄａｎｄＡｎａｌｓｉｓｏｆｔｈｅＦｕｎｃｔｉｏｎｏｆＰｉＰＩＰＫＤ８ｉｎｙｙＰｈｙＵ）ｐｈ化ｏｒａＩｎｆｅｓ化ｎｓ申请人：董磊学科口类：理学学科专业：生物化学与分子生物学研究方向：分子病理学指导教师；刘惠荣教授论文提交日期－五年六月：二〇内蒙古农业大学研究生学位论文独创声明Ｉ本人申明所呈交的学

2、位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加Ｌ乂标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人臣经发表或撰写过的研究成果，化不包括为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。之处人承担一申请学位论文与资料著有不实，本切相关责任。论文作者签考：日期：也叩哥内蒙古农业大学硏究生学位论文版权使用授权书本人完全了解巧蒙古农业大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知

3、识产权单位属内蒙古农业大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文王作成果时署名单位为内蒙古农业大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为内蒙古农业大学。学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阀和借阅。学校可Ｗ公布学位论文的全部或部分内容（保密内容除外）、，采用影印缩巧或其他手段保存论义。论文作者签葦：指导教师签名：方煤）曰觀：Ｗ！遮华气摘要致病疫霉是一类世界性分布的毁灭性的植物致病菌，其有性生殖对该物种的生存及演化非常重要一，但分子机理至今尚未阐明。在

4、疫霉茜属中发现类新的Ｇ蛋白偶联受体（Ｇｐｒｏｔｅｉｎｃｏｕｐｌｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ＧＰＣＲ），在其七次跨膜结构域的Ｇ端偶联有—ｈａｔｉ个礙脂酸肌醇激醉结构域（ＰｈｏｓｐｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌｈｏｓｈａｔｅｋｉｎａｓｅＰＩＰＫ），该蛋白ｐｐ，－家族被命名为ＧＰＣＲＰＩＰＫｓ（ＧＫｓ），共包括１２个成员。本研究初步对致病疫霉－ｓ－公Ｓ基因功能进行了研究分析ＧＫ家族的巧ｉＶ巧；：。Ｗ致病疫霉ＨＱＫ８－３为研究材料，通过绿色焚光蛋白表达载体建立了致病疫霉的遗传转化体系－；通过实时定量ＲＴＰＣＲ技术，对致病疫

5、霉不同发育阶段的组织器官中化巧尸必￡＞８基因的表达进行了检测）：克隆致病疫霉巧化肛ＺＳｃＤＮＡ蛋白编－Ｐ－－－码区，构建了ＰｉＩＰＫＤ８巧光蛋白融合表达载体，对ＰｉＰＩＰＫＤ８的亚细胞定位进－户／巧■公Ｓ的干ＳＴＯＲＡＡ行了检测；通进电转化将巧：扰载体ｐ（１９３５）转入致病疫霉－－公Ｓ基因的功能中，对干化茵株的表型进行了分析，Ｗ揭示巧戶化Ｋ。一）实验结果表明：（１直接电转化法对致病疫霉來说是种可行的遗传转化方法，该法的转化率约是原生质体转化方法的２倍，且比原生质体转化法更加简单、快速２－巧－／３併做ｃＤＮ

6、Ａ蛋白编码区序列为；（）致病疫霉茜株峭脱３的３０４５ｂｐ长，编码的蛋白质含１０巧个氨基酸，与ＮＣＢＩ公布的序列长度及编码蛋白质氨基酸。ｃＤＮＡＮＣＢＩ公９数量相同但该序列与布序列有个碱基差异，其编码的蛋白质氨基Ｂ巧－－做在致病疫霉酸序列与胞Ｉ公布序列有３个氨基酸差异（３）戶乃矿；致病疫霉ＨＱＫ８－３的休止抱中相对表达量最赢在萌发包囊、抱子囊、游动抱子和营养菌丝中門－－巧依次减少；（４）致病疫霉ＰＩＰＫ腑蛋白可能定位于茜丝內的颗粒状结构中；）巧－戶巧Ｔ－做沉致病疫霉默导致菌株的菌丝生长稀疏，抱子囊及游动抱子数量减少，

7、与相反交配型菌株有性化殖产化的卵抱子数量减少，说明该基因参与致病疫霉菌丝的生长、袍子囊的产生和有性生殖。－戶做参与本研究揭示了致病疫霉巧致病疫霉生长发育。对今后揭示致病一些重要生命现象的分子机理及对该病害的有效防治具有重要的意义疫霉。ＣＲ－Ｐ件－￣做ＩＰＫｓ戶／饼关键词；致病疫霉基因干扰：遗传转化ＧＰ；：ｔ－＂Ｓｔｕｄｙ抑ｄＡｎａｌｓｉｓｏｆ化ｅＦｕｎｃｉｏｎｏｆ巧戶／戶足Ｚ）８ｉｎ戶卸／碱／ｗｒａｙ巧ＩｎｆｅｓｔａｎｓＡｂｓｔｒａｃｔ戶Ａ卿片伽ｒａ如知化ｗｉｓａｗｉｄｅｌｙｄｉ

8、ｓｔｒｉｂｕｔｅｄａｎｄｄｅｓｔｒｕｃｔｉｖｅｐａｔｈｏｇｅｎｏｆｐｏｔａｔｏ．ｐＴｈｅｓｅｘｕａｌｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｓｖｅｒｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｆｏｒｔｈｅｓｕｒｖ