mir1918在番茄与致病疫霉互作中的特性及功能分析

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1、犬嫂？大學ＤＡＬＩＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ工睡ｆｉ５５±＃位正文ＭＡＳＴＥＲＡＬＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮｎｉｉＲ１９１８在番煎与致病疫霉互作中的特性及功能分析生物工程工释领城作者姓名指忌脑＿＇、．答辩日期！！１１１宇专业学位硕士学位论文ｍｉＲ１９１８在番煎与致病疫霉互作中的特性及功能分析ＣｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃａｎｄＦｕｎｃｔｉｏｎａｌＡｎａｌｙｓｉｓｏｆｍｉＲ１９１８ｉｎＴｏｍａｔｏａｎｄＰｈｙ

2、ｔｏｐｈｔｈｏｍｉｎｆｅｓｔａｎｓＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ作者姓名：王炜晨工程领域：生物工程学号：３１３１８０３２指导教师：楽雨时副教授完成日期：２０１５年５月大连理工大学ＤａｌｉａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ大连理工大学学位论文独创性声明作者郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行研宄工作所取得的成果。尽我所知，除文中己经注明引用内容和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体己经发表的研究成果，也不包含其他己申请学位或

3、其他用途使用过的成果一。与我同工作的同志对本研究所做的贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。若有不实之处，本人愿意承担相关法律责任。＇ｆｎｉ点：学位论文题目：丨８右泰Ｍ软十ｆｅ特功．作者签名：长期：年月／ｏ曰日大连理工大学专业学位硕士学位论文摘要一ｍｉｃｒｏＲＮＡｍ－（ｉＲＮＡ）是生物体内广泛存在的类２１２４ｎｔ的非编码单链小ＲＮＡ分子。它主要通过沉默其祀基因的表达，调控生物体的生长发育、代谢途径和胁迫响应等－过程。近年来的研宄表明，ｍｉＲＮＡ在植物病原物互作中也起着

4、重要作用，与宿主的抗病性和病原物的致病性均密切相关一。番痴是种世界范围内广泛种植的重要经济作物，而每年由致病疫霉〔Ｐｈｔｏｈｔｈｏｒａｉｎｅｓｔａｎｓ）侵染导致的番煎晚疫病则对其生产造成巨ｙｐｆ大损失。目前，番蘇和致病疫霉互作中的ｍｉＲＮＡ并未得到深入研宄，而作为同时存在于番前和致病疫霉中的ｍｉＲ１９１８也并未得到广泛的关注。基于上述背景，本研究主要利用植物基因工程的研宄方法探究了ｍｉＲ１９１８在番前与致病疫霉互作中的特性及功能。－－ＴＧ首先，通过生物信息学分析，预测到ｍｉＲ１９１８在番前中的範基

5、因ｓｌｙｌ、ｓｌｙＴＧ２－和ｓＴＧ－、ｉ－ｉ－ｌｙ３，以及在致病疫霉中的範基因ｐｉＴＧｌｐＴＧ２和ｐＴＧ３。结果表明，－ｍｉＲ１９１８可能与宿主抗性和病原物致病性密切相关。通过实时焚光定量ＰＣＲ（ｑＲＴＰＣＲ）检测后发现，在番前与致病疫霉互作的过程中，ｍｉＲ１９１８在二者体内呈现不同的表达特性，并造成相应ＩＥ基因表达量的改变，暗示该ｍｉＲＮＡ在此过程中可能起重要作用。其次，以拟南芥ｍｉＲ１５９ａ前体基因为骨架序列，并通过ＰＣＲ引入突变，将前体骨＿架上的ｍｉＲ１５９ａ和ｍｉＲ１５９ａ分别突变为ｍｉＲ１９

6、１８和ｉｎｉＲ１９１８、构建了人工ｍｉＲ１９１８（ａｍｉＲ１９１８）植物表达载体。最后，通过在番却体内瞬时表达和稳定表达ａｍｉＲ１９１８后发现，过表达ａｍｉＲ１９１８可．。减弱番煎对致病疫霉的抗性，同时在此过程中ＩＥ基因的表达受到抑制该结果表明，ｍｉＲ１９１８通过抑制其ＩＥ基因的表达参与番琉与致病疫霉的互作。关键词：ｍｉＲＮＡ勒１基因５致病疫霉人工ｍｉＲＮＡ；；番１；；－－ＩｍｉＲ１９１８在番筋与致病疫霄互作中的特性及功能分析ＣｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃａｎｄＦｕｎｃｔｉｏｎａｌ

7、ＡｎａｌｓｉｓｏｆｍｉＲ１９１８ｉｎｙＴｏｍａｔｏａｎｄＰｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｉｎｆｅｓｔａｎｓＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎＡｂｓｔｒａｃｔ－－ｍａｒｅｎｅ－ｉｃｒｏＲＮＡｓｍｉＲＮＡｓｏｋｉｎｄｏｆ２１２４ｎｔｓｉｎｌｅｓｔｒａｎｄｅｄｎｏｎｃｏｄｉｎｓｍａｌｌＲＮＡｓ（）ｇｇ，ｗｈｉｃｈｗｉｄｅｌｙｅｘｉｓｔｉｎｏｒｇａｎｉｓｍｓ．ＢｙｓｉｌｅｎｃｉｎｇｔａｒｇｅｔｅｎｅｓｍｉＲＮＡｓｒｅｕｌａｔｅｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｇ，ｇｐｒｏｃｅｓｓｅｓｓ

8、ｕｃｈａｓｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ｍｅｔａｂｏｌｉｃｐａｔｈｗａｙ，ｓｔｒｅｓｓｒｅｐｏｎｓｅａｎｄｓｏｏｎ．Ｒｅｃｅｎｔｌｙ，ｍ－ｉＲＮＡｓｈａｖｅａｌｓｏｂｅｅｎｒｏｖｅｄｔｏｂｅｉｖｏｔａｌｍｏｌｅｃｕｌｅｓｉｎｌａｎｔａｔｈｏｅｎｉｎｔｅｒａ