2010年宁夏致病疫霉群体特征的研究

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1、河北农业大学硕士学位论文2010年宁夏致病疫霉群体特征的研究姓名：宋俊丽申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：朱杰华；杨志辉20120523摘要马铃薯晚疫病是由致病疫霉聊tophthorainfestans(Mont．)deBary引起的，是马铃薯生产上最具毁灭性的病害之一，给马铃薯生产造成了巨大损失。本研究对2010年采集自宁夏的94个马铃薯晚疫病菌株进行了交配型和甲霜灵抗性的表型测定，并利用聚合酶链式反应一限制性片段长度多态性(PCR．RFLP)、简单序列重复(SSR)和扩增片段长度多态性(AFLP)等

2、分子标记技术对该群体的基因型进行了分析。由于在实验过程中发现了大量的A2交配型菌株，又选取了黑龙江、吉林和河北等地8省以及瑞士、美国和荷兰共计82株致病疫霉菌株，其中A1交配型40株，A2交配型42株，测定了该群体对甲霜灵的敏感性，并分析了该群体的线粒体基因型、SSR基因型及AFLP基因型。主要研究结果如下：1．宁夏致病疫霉群体特征：1．1交配型的测定：对2010年采自宁夏的94株致病疫霉进行了交配型的测定，结果表明，A2交配型86株，A1交配型1株，自育型7株。1．2甲霜灵敏感性测定：测定了94株宁夏致病疫霉菌

3、株对甲霜灵的敏感性，结果供试菌株全部为抗性菌株，其中高抗菌株89株，中抗菌株5株。1．3线粒体DNA单倍型测定：以来自其它地域的8株致病疫霉菌株作参考，利用聚合酶链式反应一限制性片段长度多态性(PCR．RFLP)对94株宁夏致病疫霉菌株的线粒体DNA单倍型进行了分析，发现所有被测菌株均为Ia型。1．4SSR基因型分析：以来自其它地域的8株致病疫霉菌株作参考，利用6对SSR引物对94株宁夏致病疫霉菌株进行了基因型鉴定，共鉴定出了2种SSR基因型，I型93株，是优势基因型，聚类结果显示群体的遗传多样性并不高，遗传差异

4、比较小。1．5AFLP基因型分析：利用4对多态性高、稳定性好的选择性扩增引物组合，对供试50个致病疫霉菌株(其中包括8个参考菌株)进行了AFLP扩增，共扩增出201条谱带，其中多态性条带173条，多态性百分率为86．1％。遗传多样性分析表明供试致病疫霉群体遗传多样性水平并不高，聚类结果显示A2交配型菌株与自育型菌株亲缘关系比较近，宁夏致病疫霉群体存在遗传分化。2．致病疫霉A1、A2交配型群体特征：2．1甲霜灵敏感性测定：测定了采集自黑龙江、吉林、河北和内蒙古等地的82个致病疫霉不同交配型菌株对甲霜灵的敏感性，结果

5、Al交配型抗性比率为55％，A2交配型抗性比率为97％。2．2线粒体DNA单倍型测定：利用聚合酶链式反应～限制性片段长度多态性(PCR．RFLP)对82个致病疫霉菌株的线粒体DNA单倍型进行了分析，发现A1交配型菌株为IIa和IIb型，A2交配型菌株均为Ia型。2．3SSR基因型分析：利用6对SSR引物对黑龙江、吉林、河北和内蒙古等地82个致病疫霉菌株进行了基因型鉴定，共鉴定出了17种SSR基因型。A1交配型菌株鉴定出12种SSR基因型，XII型是优势基因型；A2交配型菌株鉴定出5种SSR基因型，III型是优势基

6、因型。2．4AFLP基因型分析：利用4对选择性扩增引物组合，对供试82个致病疫霉菌株进行了AFLP扩增，共扩增出212条谱带，其中多态性条带190条，多态性百分率为89．6％。遗传多样性分析表明供试致病疫霉群体遗传多样性水平并不高，聚类结果显示整体上A1交配型菌株与A2交配型菌株聚在不同的分支上，AFLP基因型与病菌的交配型有一定的相关性，与地理来源没有明显相关性。关键词：致病疫霉；交配型；甲霜灵抗性；线粒体单倍型；简单序列重复；扩增片段长度多态性PopulationCharacteristicsofPhytop

7、hthorainfestansfromNingxiaofChinain2010Mastercandidate：SONGJun-1iMajor：PlantPathologySupervisor：ProfessorZHUJie-huaAssociateprofessorYANGzhi-huiAbstractPotatolateblight,whichiscausedbyPhytophthorainfestans(MonL)deBary,isoneofthemostdevastatingdiseasesinpotato

8、production．Thephenotypeof94isolatescollectedfromNingxiaprovincein2010Wasinvestigatedformatingtypeandmetalaxylresistance．ThegenotypeWasalsoassessedformitochondrialDNAhaplotypeswithpolymera