胃粘膜上皮癌变相关蛋白质分子的筛选与鉴定

《胃粘膜上皮癌变相关蛋白质分子的筛选与鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、．．尊巧巧砂Ｈ￣分类号民３６５密级公开＼ＵＤＣ６１０，．学校代码１０５５５色ＪＬｉ。案酔脚慰纖麵．偉术学位）動胃枯膜上皮癌变相关蛋白质分子的矫选槪Ｉ勤議陰＇竭聲研究生姓名：张志伟指＾导獅、职称：痛胜教授＾：Ｉ学科专业：基础医学（病理学与病理生理学）＾研究方向：恶性肿瘤发病的易感分子机制研究心Ｖ…’麵瞧，／ｉ．猶．１禱＇墳霄．｜編ｔ，￡纖藝損議；遍乂苗／ＵＮＩＶ巨ＲＳｍｒＯＦＳＯＵＴＨ州ＩＮＡｆ枯膜上皮癌变相关蛋白质分子的筛选与鉴定ＪＬ论文作者签名：娜户指导教师签＆Ａ冷＾论文

2、评阅人１；吴膝革，教授，请导，中南大举评阅人２；张伟华，教授，博导，哈尔滨戾科大学评阅人３；杨惠跨，教授，博导，中山大学答辩委员会主席：陈幸辆，教按，博导，中南大学委员：１冯德云，教授，情导，中南乂学委员２；杨力芳，教授，博导，中南大学委员３；善志脾，教按，博导，南华大学委员４韋務谋，教授，博导，南华大学：委员５：何淑雅，教按，博导，南华大学委员６；唐朝巧，教授，博导，南华大学２０１５１２５答辩日期：年月日南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的积巧成果。尽我所，除论

3、文中别加标注和致的地方外，论文中知了特谢不包含其性人已经发表或，撰写过的研究成果也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证而使。工作志究所均已书用过的材料与我共同的同对本研作的贡献在论文中作。。本人完全意识到本声的法律结本人承担了明确的说明明果由＾＇；作者签名年日心月：皆）／｜论南华大学位文版权使用授权书学（博本学位论文是本人在南华大学攻读）±学位期间在导师指导下完成的学位论。，＾文本论文的研究成果归南华学所有本论文的研究内容不得＾＾其它单位的名大。目意保留、使位论，Ｐ：义发表本人同南华大学有关用学文的规定学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阀和借阅

4、；学校可Ｗ公布学位论文的全部或部分内、容，可采缩它手段保；国家Ｗ用复印印或其留学位论文学校可根据或湖南省有。入《：ｔ关部口规定送交学位论文同意学校将论文加中国优秀博硕学位论文全文，《据》并按中国学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关数库优秀博硕±权益。国同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中学位论文全过。数库》，网络会公提供信息服务对于的，解密文据并通向社众涉密学位论文运。该授权后用作者签名：年日却月日导师签名年月／戶胃粘膜上皮癌变相关蛋白质分子的筛选与鉴定摘要目的：胃癌是我国及亚太地区最常见的恶性肿瘤之一。本研究旨在寻找新的胃癌诊断蛋

5、白质分子，进一步阐明胃粘膜上皮癌变的分子机制。方法：1.采用激光捕获显微切割（LCM）技术，分别获取高纯度的正常胃粘膜（NGM）、非典型增生（AH）、低分化腺癌（GPDAC）及淋巴结转移癌（LMGAC）组织，采用同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）结合二维液相色谱联用质谱（2DLC-MS/MS）技术，寻找胃粘膜上皮癌变过程中不同阶段的差异表达蛋白质分子。2.选择PRSS1、HSP90α/β、TGM2、SerpinA3和P180蛋白质进行进一步的验证与分析。首先采用Western-blot，检测5个蛋白质在NGM、AH、GPDAC及LMGAC中的表达情况；其次通过免疫组织化学染色，观察5

6、个蛋白质在组织芯片（包含NGM、AH、GAC及LMGAC）中的表达情况，检测结果采用ROC曲线分析，揭示5个蛋白质表达对胃腺癌早期诊断的评估作用。3.构建pcDNA3.1-PRSS1真核表达载体，转染GES-1细胞，建立了PRSS1高表达的GES-1细胞系（GES-1/pcDNA3.1-PRSS1），同时构建pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-PRSS1干扰载体，转染MGC803细胞，建立PRSS1低表达的MGC803（MGC803/pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-PRSS1）细胞系；通过绘制细胞生长曲线、平皿克隆形成实验、软琼脂集落形成实验、流式细胞术、Hoeche

7、st33258染色、细胞划痕迁移实验、Transwell迁移与侵袭实验，观察PRSS1表达改变对GES-1和MGC803细胞增殖、周期、凋亡、迁移与侵袭的影响；最后采用Western-blot检测PRSS1表达改变对GES-1和IMGC803细胞中Wnt1/β-catenin信号通路的影响。结果：1.本研究总共鉴定出胃粘膜上皮癌变相关差异表达蛋白质243个，在胃癌中表达上调的蛋白质153个，下调者90个，有的蛋白质在NGM、AH、G