肾缺血再灌注损伤中mirna表达谱筛选及mir-98调控huvec凋亡的作用

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1、分类号论文编号密级之禾度＾若硕±学位论文腎缺血再灌注损伤中ｍｉＲＮＡ表达谱筛选及－ｍｉＲ９８调控扫ＵＶＥＣ调ｔ的作用ＳｃｒｅｅｎｉｎｏｆｍｉＲＮＡＥｘｒｅｓｓｉｏｎｉｎＲｅｎａｌＩｓｃｈｅｍｉａｇｐＲｅ－ｅｒｆｉｉｓｉｏｎＩｎｕｒａｎｄｅｆｆｅｃｔｏｆｍｉＲ９８ｏｎｌ：ｈｅｐｊｙａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆＨＵＶＥＣ研巧生姓名；李和文学号：２０１２１０６６指导教师二军医大学第一附属长海医院：于光副教授第学科、专业：内科学（肾脏病）学位类型：科学学位答辩日期：２０１５年５月二〇—五

2、年五月第二军医大学硕±学位论文腎缺血再灌注损伤中ｍｉＲＮＡ表达谱筛选及ｍ－９８ｉＲ调控ＨＵＶＥＣ调亡的作用ＳｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｍｉＲＮＡＥｘｒｅｓｓｉｏｎｉｎＲｅｎａｌＩｓｃｈｅｍｉａｐＲｅｅｒｆｕａｎｄ－ｓｉｏｎＩｎｕｒｅｆｆｅｃｔｏｆｍｉＲ９８ｏｎ化ｅｐｊｙａｐｏｐ化ｓｉｓｏｆＨＵＶＥＣ研巧生；李和文学科与专业：内科学研巧方向：肾脏病学指导老师：于光培养单位一；第二军医大学第附属医院第二军医大学二０—五年五月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究王作。除了文中特别

3、加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果一。与我同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。学位论文作者签名：签字日期：年广月日学位论文使用授权书声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定，第二军医大学有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文（。保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：

4、导师签名；■？。签字日期：＞日签字日期：三ｔ年乐年／月＾ＩＪ月／日目录摘要１Ａｂｓｔｒａｃｔ４英文缩略词表７前５９一第部分大鼠肾脏缺血再灌注损伤时ｍ１１ｉＲＮＡｓ表达谱的筛查＃料与方法１１Ｓ果１７论２０结论２１第二部分缺氧复氧损伤时ＨＵＶＥＣ中ｍ－９８的表达变化ｉＲ及其通过靴基Ｃａｓａｓｅ－３对细胞涧亡的调控因ｐ２２材料与方法２２结果３３讨论４１全文小结４３综述４４５１参考文献在读期间发表论文和参加科研工作情况巧致谢６０肾缺血再灌注损伤中ｍ－ｉＲＮＡ

5、表达谱筛选及ｍｉＲ９８调控ＨＵＶＥＣ调亡的作用摘要一ｍ第部分大鼠肾脏缺血再灌注损伤时ｉＲＮＡ表达谱的筛查【研巧目的】通过基因苍片筛选大鼠肾脏缺血再灌注损伤后ｍｉＲＮＡｓ表达谱的变化并分析。【研究方法】１、构建ＳＤ大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型：大鼠经适应性饲养１周后，禁食约１２ｈ，腹腔麻醉并消毒后，经腹正中线切开皮肤、腹膜，充分暴露双侧肾蒂，使用无创微型血管夹迅速夹闭双侧肾蒂，伤口覆盖盐水纱布，恒温灯保持腹部体温，４５ｍｉｎ。后同时松开血管夹，缝合腹膜和皮肤大鼠造模１２ｈ后，再次麻醉大鼠，收集标本。２、实验分组：１０周龄大鼠１２只随机分为两姐，每沮６

6、只：①实验组：双侧肾脏血管夹夹闭４５分钟后再灌注１２小时后收集标本术组：同样的方法游离暴；⑤假手ｉｎｈ后逐层缝合曰。露双侧肾蒂，直接覆盖盐水纱布后等待４５ｍ，１２切３、：也标本收集和检测方法脏穿刺取血，检测血清肌酢与尿素氮，同时取肾脏利用ｍｉｃｒｏＲＮＡＳ片技术检测肾脏缺血再灌注时ｍｉＲＮＡ的表达变化最后通过ＲＴ－ＰＣＲ验证芯片检测结果。【结果】１、成功构建大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型，缺血再灌注损伤后血清肌巧和尿素氮水平明畳升髙。２、通过ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ芯片结果观察到大鼠肾脏缺血再灌注损伤后３６条ｍｉＲＮＡｓ出现明显的表达变化－ＰＣＲ，其中有１

7、５条ｍｉＲＮＡｓ表达差异超过两倍。通过ＲＴ一致５验证与ｍｉＲＮＡｓ巧片结果，其中１０条ｍｉＲＮＡｓ表达上调，条ｍｉＲＮＡ表－－－ｍ－－达下调，表适上调的分别是：ｍｉＲ９８、ｍｉＲｌＷａ、ｍｉＲ１４化、ｉＲ２９２５ｐ、－－－－－ｍｉＲ４３２、ｍｉＲ３２７、ｍｉＲ３７４、ｍｉＲ２９０、ｍｉＲ３５２、和ｍｉＲ８９４，下调的ｍｉＲＮＡ－－－－－是：ｍｉＲ１４５、ｍｉＲ２９ａ、ｍｉＲ３巧、ｍｉＲ１４０