缺血后处理对肾缺血再灌注损伤保护作用的基因表达谱研究

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1、缺血后处理对肾缺血再灌注损伤保护作用的基因表达谱研究中文摘要目的建立肾缺血再灌注损伤(isehemia-reperfusioninjury，IRI)缺血后处理(ischemicpostconditioning，IPO)大鼠模型，研究IPO对缺血再灌住损伤肾基因表达谱的影响，探讨其保护机制。方法选用8～12周成年健康SD雄性大鼠60只，随机分为6组：对照组(S组)、缺血再灌注组m缺血后处理A、B、c、D组，通过测定血尿素氮(BUN)和肌酐(SCr)，肾组织结构损伤程度评分，筛选出成功的IPO模型。然后选取成

2、年健康SD雄性大鼠6只分为2组：缺血再灌注组和IPO组。缺血再灌注组：结扎右侧肾蒂，夹闭左侧肾蒂60min后恢复灌注。IPO组：在肾脏缺血60rain后进行6次开放10s+阻断10s的循环然后充分开放灌注。饲养24h后迅速切取左肾，分别将左肾组织放入液氮低温保存。进行RNA抽提、探针制备和芯片杂交，杂交后立即进行扫描检测信号收集图像。应用SoflfireDecisionsite8．0软件分析某基因是否有表达，以及两组表达程度是否有差异。根据基因编码蛋白的功能对差异表达超过两倍的基因进行初步分析。结果缺血后

3、处理组与缺血再灌注组。肾脏组织比较共有70条基因表达有差异，基因表达上调的有48条，基因表达下调的基因有22条。这些基因主要涉及细胞代谢与损伤、凋亡调控相关蛋白、信号转导和转录、炎症相关因子、氧化应激相关因子等。结论成功建立了肾缺血再灌注损伤IPO大鼠模型，IPO可能作用于多个基因靶点，减轻肾脏缺血再再灌注损伤。硕士研究生李涛(麻醉学)指导老师马加海主任医师关键词：肾脏；缺血再灌注损伤；缺血后处理；基因芯片；大鼠Geneexpressionproffiesofischemicpostconditionin

4、gonrenalischemicreperfusioninjuryAbstractObjectiveToresearchthegeneexpressionprofilesofischemicpostconditoningonrenalischemicreperfusionmjury．Methods60SDratswereallocatedrandomlyto6groups：controlgroup(s，n210)，Ischemia-reperfusion(1R)groupandischemicpostco

5、nditioninggroupofA，B，C，D．Choosethebettermodeloftheischemicposteonditoningbythebloodsamplesandnephridialtssuesection．Then，6SDratswereallocatedrandomlyto2groups：Isehemia-reperfusiongroupandischemicpostconditoning(m-P)group．GroupIR：gaturetherightrenalpediele

6、．Leftrenalpediclewasclampedfor60rainandthenreperfused．IR-Pgroup：Leftrenalpcdiclewasclampedfor60minandreperfusedafter6cyclesof10sischemiaand10sreperfusion．Raisedafter24hqllicUycuttheleftkidneyandputtheleftki血cytissueinliquidnitrogencryopreservaton，respecti

7、vely．ByRNAextraction,probepreparadon，chiphybridization,sweepsignalandcollectimage．useSoRflreDecisionsite8．0softwaretoanalyzethegeneexpression．Accordingtothefunctionofthegeneencodingproteinanalyzegenesdifferentiallyexpressedmorethantwiceasmuch．ResultsCompa

8、redwithIRgroup．70geneexpressionisdifferentintheIR-Pgroup．Thereale48geneswereup-regulatedand22genesweredown-regulated．Thesegenesmainly．involved：Cellmetabolismanddamage，appoptosis-relatcdprotein,signaltransductionandW