猪丹毒杆菌的分离鉴定和免疫特性分析

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1、？ｉ－－？１．‘．－．’為请農達义參硕．±学位论文猪丹毒杆菌的分离鉴定和免疫特性分析部基指导教师李玉峰副教授专业名称预防兽医学研究方向动物传染病诊断与免疫二０—答辩日期五年五月ｙ一＇＾｛化＂■―．：－：＇－＇＜义＇．．－；．‘－．．一，？：＂早其早揉－，４；？—－？？，＇，，．－．？Ｖ－．■扮ＯＬＡＴＩＯＮＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＺＡＴＩＯＮＡＮＤ，ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＩＣＡＬＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＳＴＩＣＡＮＡＬＹＳ扮ＯＦＥＲＹＳＩＰＥＬＯＴ

2、ＨＲＩＸＲＨＵＳＩＯＰＡＴＨＩＡＥｂｙＺＯＵＹａｏＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｉｔｔｅｄｔｏ；ＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＩｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆ化ｅＲｅｑｕｉｒｅｍ畑ｔｆｏｒｔｈｅＭａｓ化ｒＤｅｒｅｅｏｆＡｒｏｎｏｍｇｇｙＣｏｍｌｅｔｅｄｉｎＡｒｉｌ２０１５ｐｐ，ＣｏｍｍｅｎｃｅｍｅｎｔｉｎＪｕｎｅ，２０１５原创性声明：所呈交的学位论文本人郑重声明，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内

3、容外，本论文不包含任何其它个人或集体已经发表或撰写过的作品成果，对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式巧明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者（需亲笔）签名；备１■＞皆年６月：曰学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被査巧和借阅。本人授权南京农业大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密□，在年解密后适

4、巧本授权书。本学位论文属于不巧巧扫１＂＂（请在１＾０：方框内打７）学位论文作者（需亲笔）签名：若表批ｒ年６月Ｌ日ｔ导师（需亲笔）签名心年占月＾日目录目录摘要夏ＡＢＳＴＲＡＣＴＶ一章文献综巧第１１红斑丹毒丝菌与猪丹毒概述１１．１红斑丹毒丝菌１１．２猪丹毒２２猪丹毒杆菌的分离、鉴定与分子生物学分型方法３２．１猪丹毒杆菌的分离３２．２猪丹毒杆茵的鉴定３２．３猪丹毒杆菌的分子分型５３猪丹毒杆菌的致病机制研究７３．１猪丹毒杆菌的毒力７３．２猪丹毒杆菌的感染途径１１

5、４猪丹毒杆菌的防控及菌株致弱方法１２４．１药物治疗口４．２疫苗预防１２４．３环境控制１４４．４致弱方法１４参考文献１６第二章猪丹毒杆茵的分离巧鉴定巧１材料和方法３０１．１材料３０１．２实验动物３０１．３细菌的分离培养与保存３０１．４细菌的Ｗ心基因窩变区序列分析３０１．５细菌的血清型鉴定３１１．６脉冲场凝胶电泳（ＰＦＧＥ）３１１．７吓巧澄敏感性试验３３１．８小鼠致病试验巧ｉ猪丹毒巧菌的分离鉴定和免疫特性分析１．９药敏试验３３２Ｓ果３４

6、２．１细菌培养特性和形态持征３４２、－．２分离株的命名ＰＣＲ鉴定和４３２ｂｐｗ心基因高变区序列分析３５２巧．３小蔚致病试验２．４血ｎ丫巧栓敏感性３８清型鉴定和２３９．５猪丹毒杆菌临床分离株的ＰＦＧＥ分型２．６４０３織４１参考文献４４第兰章巧丹毒押茵分离巧的致弱及其致弱株的特性鉴定４７１材料与方法＂４８１．１材料４８１．２实验动物４８１．３强毒株的致弱４８１．４小鼠致病试验４８１做４基因４８．５致弱株的巧商变区序列分析１．６脉冲场凝胶电泳（ＰＦＧＥ）４９

7、１．７纖试验４９１．８全自动生化反应分析４９２结果４９２．１致弱过程中各代次菌株的吓晚澄敏感性、镜下形态变化和Ｗ心高变区序列分析４９２．２强弱菌株生长曲线和ＣＦＵ测定５１２．３各代次菌株的ＰＦＧＥ图谱５２２．４小鼠致病试验５３２．５纖试验５４２．６全自动生化反应结果５４３磁５６参考嫌５８第四章巧丹毒巧苗的致病特性研究６１目录１材料与方法６２１．１材料６２１．２菌株、细胞和试验动物６２１．３猪丹毒巧苗强、弱毒株感染小鼠位１．４小鼠脾淋己细胞的分离、

8、总ＲＮＡ提取和ｃＤＮＡ合成６３１