毒死蜱降解菌的分离、鉴定以及联合植物促生菌对土壤的改良

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1、学校代码：10270分类号:Q93学号=122200884硕士学位论文论文题目毒死蜱降解菌的分离、鉴定以及联合植物促生菌对土壤的改良学院生命与环境科学学院专业微生物学研究方向微生物分子生物学研究生姓名蒋秋悦指导教师肖明教授完成日期2015年4月8日论文独创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的研宄工作及取得的研宄成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或机构己经发表或撰写过的研宂成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中做了明确的声明并表示了谢意。作者签名：曰期：7^、u论文使用授权声明本人完全了解上海师范大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的

2、复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以釆用影印、缩印或其它手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。作者签名^导师签名：日期：入。“本论文经答辩委员会全体委员审查，确认符合上海师范大学硕(博）士学位论文质量要求。答辩委员会签名：主席（工作单位、职称）:导师：ShanghaiNormalUniversityMasterDissertationTheisolationandidentificationofchlorpyrifosdegradingbacteriaanditseffectonsoilamendmentwithPGPRDepartmentCollege

3、ofLifeandEnvironmentalSciencesSpecialtyMicrobiologyResearchDirectionMicrobiology&molecularbiologyNameQiuyueJiangSupervisorProfessorMingXiaoCompleteDataApril2015上海师范大学硕士学位论文摘要论文题目：毒死蜱降解菌的分离、鉴定以及联合植物促生菌对土壤的改良学科专业：微生物学学位申请人：蒋秋悦指导教师：肖明教授摘要土壤污染已经成为全球关注的热点环境问题之一，而农药污染又是土壤污染中的最为普遍的现象。毒死蜱是一种中等毒性的有机磷农药，它可以有

4、效应用于农业与城市害虫的防治，但在土壤中残留时间较长，会造成土壤污染等一系列问题。本文借鉴国内外学者的相关研究经验，筛选得到了能高效降解有机磷农药的土壤细菌，并联合PGPR细菌进行了对污染土壤改良效果、促进植物生长等研究，这些研究初步证实复合土壤改良剂对农药污染土壤改良的可行性。从金山大田植物根际土壤和园艺土壤中，经过筛选排重后，共得到11株毒死蜱降解菌。经16SrDNA测序，BLAST比对，初步鉴定菌株属于伯克氏菌属（Burkholderia）、克雷伯氏菌属（Klebsiella）、拉乌尔菌属（Raoultella）、肠杆菌属（Enterobacter）。其中，伯克氏菌属CD5和CD7菌株

5、能在培养基和土壤中高效降解毒死蜱。盆栽实验证实了CD5和CD7菌株对植物生长、土壤酶活性均具有促进作用，其中CD7菌株的促进效果较明显。菌株CD7与JD37按1:1配比时，可以促进植物生长，并能在25天内降解土壤中约66.43%毒死蜱。进一步研究发现，载体用量相同的条件下，蚯蚓粪比滑石粉吸附更多混合菌体，吸附率达77.43%，在室温保存1个月后仍能维持活菌7数约为4.81×10cfu/g；载体和土壤1：1配比时对植物生长、土壤酶活性与土壤微生物数量的提高效果最明显。PGPR菌株JD37的全基因组测序与生物信息学分析表明，JD37菌株具有促生与生防作用，并能有效定殖在植物根际。对相关基因进行挖

6、掘共找到5类金属抗性基因、2类温度-休克抗性基因、5类细菌运动基因和4类植物根际定殖基因；共预测到31个次级代谢合成基因簇，其中具有功能的占35.48%。将JD37、CD7菌株按1：1配比混匀后添加至含蚯蚓粪制备成固体剂型复合土壤改良剂应用于盆栽试验。数据显示，施用土壤改良剂之后，处理组Ⅰ（8周I摘要上海师范大学硕士学位论文动态检测后播种小青菜）、处理组Ⅱ（直接播种小青菜）均具有促进植物生长，较好维持各时期土壤微生物数量，提高土壤酶活性等作用。2个处理组中毒死蜱浓度分别降至238.98mg/L和208.98mg/L。上述试验结果表明，将筛选得到的毒死蜱降解菌与PGPR菌株JD37联合，连同载

7、体一起制备的复合土壤改良剂对植物生长具有促生效果，对土壤酶活性有提升作用，还能降低土壤中毒死蜱的含量，细菌全基因组测序与生物信息学分析验证了PGPR菌株在土壤改良剂中发挥的作用，这些研究为将该土壤改良剂应用于农药污染土壤修复、促进农作物生长奠定了基础。关键词：毒死蜱降解、桔黄假单胞菌JD37、PGPR、微生物基因组学、复合土壤改良剂论文类型：c应用研究IIShanghaiNormalUniversityMas