弓形虫tgprmt5基因的克隆鉴定，细胞定位及功能初步分析

《弓形虫tgprmt5基因的克隆鉴定，细胞定位及功能初步分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号密缴ＵＤＣ编号，或篇似緣硕壬学位论文弓形虫ＴｇＰＲＭＴＳ基因的克隆鉴定，细胞定位及功能初步分析Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ｓｕｂｃｅｌｌｕｌｅｒｌｏｃａｔｉｚａｔｉｏｎａｎｄａｎａｌｓｉｓｏｆｔｈｅｙｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆＴＰＲＭＴ５ｉｎＴｂｘ繊。〇。航ｇ巧舶各李芬香导师姓名陈晓光＆间桂云教授专业名称病原生物学培养类型学术型论文提交日期２０１５年５月南方医科大学２０１２级硕去学位论文弓形虫ＴｇＰＲＭＴ５基因的克隆鉴定，细胞定位及功能初步分析Ｉｄｅｎ村巧ｃ

2、ａ村ｏｎｓｕｂｃｅＵｕｌｅｒｌｏｃａｔｉｚａ村ｏｎ，ａｎｄａｎａｌｓｉｓｏｆ化ｅｆｔｉｎｃｔｉｏｎｏｆＴｙｇＰＲＭＴ５ｉｎＴｏｘｏｌａｓｍａｏｎｄｉｉｐｇ３１０３００６６课题来源：国家自然科学基金（）学位申请人李芬香导师驻違炼晓光＆闻桂看教授专业違称病原生物学培养类型学术型培养层次研究生所在学院公共卫生与热带匯学学院各辩委巧会主席余新扔教校答辩委员会委员吴忠道教授伦照荣教授罔桂表教授马劝１教授朱家勇教授２０１５年５月２０日广州２中文摘要弓形虫ＴｇＰＲＭＴＳ基因的克隆

3、鉴定，细胞定位及功能巧步分析硕壬研究生：李芬香指导老师：陈晓光＆肖桂云教授摘要一．研究背景弓形虫是一种细胞内寄生的单细胞原虫，能够感染几乎所有温血动物的有核细胞。据估计全球约有１／３的人曰受到弓形虫的威胁，某些地区血清阳性率甚至可高达一８０％。弓形虫是类重要的机会性致病原虫。慢性感染弓形虫后，机体免疫力正常的宿主主要表现为无任何临床症状的隐性感染；而在－些免疫功能下降或受抑制的宿主如肿瘤患者＂＂、艾滋病人等的体内，休眠的虫体则会近速増生繁殖，破坏宿主细胞而引起多器官、多脏器的损害，严重者可导致宿主死亡。若宿主孕期感染弓形虫，可导致流产

4、、死胎、崎形等，一幸存者也常遗留智能低下等严重后遗症。因此弓形虫也是中分别广泛可引起人兽共患病的寄生原虫。弓形虫机会性致病的生物学基础是速殖子和缓殖子的相互转化。速殖子在宿主免疫系统或相关药物的作用下可转换为缓慢増殖的缓殖子，Ｗ包囊的形式长期潜伏于脑组织中。然而目前临床上治疗弓形虫病的药物如艺胺略巧、－－乙醜螺旋霉素、复方新诺明等或者细胞因子如ＩＦＮＹ、ＩＬ２等，对包囊内的缓殖子却几乎没有杀灭作用，。因此阐明弓形虫速殖子和缓殖子相互转化的调控机制，可发现防治弓形虫病的新途径。弓形虫速殖子在转他为缓殖子的过程中，会发生形态和生理代谢的巨大改变，那么

5、必然伴随有大量基因表达的变化。在高等生物中，这些变化通常是在转录水平调控的，然而有研究发现在顶复口寄生虫包括弓形虫与拒原虫其基因组中只有很少的转录因子序Ｉ硕±学位论文列，这提示，在这些顶端的真核生物中必然还存在着其他的调控途径。一在真核生物中。，表观遗传基因调控是种重要的基因调控方式而组蛋白送样一类与染色质紧密连接的小分子蛋白的翻译后的修饰更是一种重要的表观遗传基因调控方式。通过分析弓形虫基因组数据库发现弓形虫存在全套编码组蛋白及组蛋白修饰酶的基因序列。而近期Ｋａｍｉ．Ｋｉｍ教授的团队对弓形虫組蛋白进行质谱分析发现，弓形虫组蛋白存在丰富

6、的翻译后修饰现象如甲基化修饰与乙酷化修饰等。这些都说明组蛋白修饰调控基因表达在弓形虫中也起着极为重要的作用。精氨酸甲基化修饰是一种广泛存在于细胞质与细胞核中的蛋白翻译后修饰现象，随着近十年Ｗ来对其深入的研究，其重要地位越来越受到大家的重视。而催化此类反应的正是蛋白质精氨酸甲基转移酶Ｐｒｏｔｅｉｎａｒｉｎｉｎｅ（ｇｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｓＰＲＭＴｓ－ｍｅｔｈ）Ｓ＾，，它通过转移腺巧甲硫氨酸上的甲基进而对祀蛋白进行甲基化修饰。ＰＲＭＴｓ主要分为２型，Ｉ型可催化生产不对称二甲基，ＩＩ型形成对称二甲基。目前发现弓形虫基因组中存在编码５种ＰＲＭＴｓ的基

7、因序列，其中ＴｇＰＲＭＴｌ可甲基化修饰弓形虫的Ａｒｇｏｎａｕｔｅ蛋白Ｗ及组蛋白Ｈ４Ｒ３，而ＴｇＣＡＲＭｌ通过修饰组蛋白Ｈ３Ｒ１７可调节基因的表达进而影响到速殖子与缓殖子间的转化。剩下的ＴｇＰＲＭＴ３、ＴｇＰＲＭＴＳ未见有相关研究报道。ＰＲＭＴ５属于ＩＩ型精氨酸甲基转移酶。在哺乳动物中，普遍发现ＰＲＭＴ５可甲基化修饰组蛋白Ｈ２Ａ、拟、Ｈ４进而影响基因的转录调节。本文旨在，通过分析ＰＲＭＴ５在弓形虫中的生物学特点。，探索它对弓形虫基因表达的影响二．