大鲵源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定、敏感药物筛选及耐药性分析

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1、单位代码—醒ｉ—須学＾１１２０１２３２８００１９５３硕士学位论文大鲵源弗氏梓檬酸杆菌的分离鉴定、敏感药物筛选及耐药性分析论文作者：曹朕娇指导教师：丁诗华教授十学科专业－：水生生物学研究方向：水产微生物生态学提交论文日期：２０１５年４月１５日＂？？？论文答辩日期－：２０１５年５月３１日一‘学位授予单位、：西南大学＼‘？中国重庆．２０１５年５月独创性声明学位论文题目：《大鲵源弗氏梓檬酸杆菌的分离鉴定、敏感药物蹄选及耐药性分析》本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得

2、的研究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果，文中已加了特别标。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、注、朋友同仁在文中作了明确说明并表示衷心感谢。学位论文作者：签字曰期：年月ｏ曰（（／学位论文版权使用授权书、本学位论文作者完全了解西南大学有关保留使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书，

3、本论文：ｆｅｆ不保密，口保密期限至年月止）。＆学位论文作者签名：导师签名：３＾签字曰期：年月０日签字曰期：７＾丨年＜月曰＿５＾＾目录目录摘ｍＩＡＢＳＴＲＡＣＴＩｌｌ一第章文献综述１１．１大鋭养殖状况１１．１．１我国大貌养殖模式１１．１．２大貌人工养殖发展前景２１．２大親的养殖病害３１．２．１大鋭养殖病害原因３１．２．２大鲵常见疾病３１．３大鋭病害防治５１．３．１大鋭疾病的预防；５１．３．２大鋭疾病的治疗５１．４大貌病原菌的耐药性研究６１．４．

4、１抗生素的应用情况６１．４．２细菌的耐药机制７二９第章弓Ｉ言第三章大貌源弗氏梓檬酸杆菌的分离鉴定１１１３．１腿１３．１．１实验材料１１３．１１．１２主要试剂３．１．３实验仪器１１３２．２实验方法１３１２．２．１菌株观察３．２．２菌株生理生化鉴定１２３．２．３１６ＳｒＤＮＡ基因序列分析及系统发育树构建１３３．２．４人工感染实验１４３．２．５胞外酶活性检测１４３．３结果与分析１５３．３．１菌株形态特征１５３．３．２菌株生理生化鉴定１５３１６．３．３１

5、６ＳｒＤＮＡ序列分析及系统发育树构建ｉ西南大学硕士学位论文３．３．４人工感染实验结果１８３．３．５菌株胞外酶活性检测结果１８３９．４舰１第四章大鲵源弗氏梓檬酸杆菌敏感药物筛选２１４．１材料及仪器２１４．１．１供试菌２１４１．１．２主要试剂２４．１．３实验仪器２１４．２实验方法２２４．２．１弗氏梓檬酸杆菌菌悬液的制备２２４．２．２弗氏梓檬酸杆菌对抗生素的敏感性实验２２４．３结果与分析２２４．４舰２３第五章中草药对弗氏梓檬酸杆菌的抑制作用研究２５５．１材料及仪器２５

6、１５．．１供试菌２５５．１．２主要试剂２５５．１．３主要仪器２５５２６．２实验方法５．．２１中草药浓缩药液的制备２６５．２．２弗氏梓檬酸杆菌菌悬液的制备２６５．２．３抑菌效果的测定２６５．２．４最小抑菌浓度及最小杀菌浓度的测定２６５．３结果与分析２７５．３．１４５种中草药液体外抑菌实验抑菌圈测定结果２７５．３．２最小抑菌浓度及最小杀菌浓度的测定２９５．４讨论３０第六章大親源弗氏梓檬酸杆菌耐药性分析３３６．１材料与仪器３３６．１．１供试菌３３６．１．２主要试剂３３

7、６．１．３主要仪器３４６．２实验方法３４６．２．１ＣＦＲ的ＤＮＡ模板的制备３４ｉｉ目录６．２．２ＣＦＲ耐药基因的ＰＣＲ扩增３４６．２．３电泳检测３６６．２．４目的片段的胶回收３７６．２．５目的片段与载体连接３７６．２．６连接产物的转化３８６．２．７蹄选阳性克隆后扩大培养３８６．２．８提取质粒３８６．２．９耐药基因测序３９６．３结果与分析３９６．．．３．１ＰＣＲ反应条件３９６．３．２菌株耐大环内酷类抗生素耐药基因的检测３９－６．３．３菌株耐ｆｉ内醜胺类抗生素的耐

8、药基因检测