多糖合剂的制备及质量鉴定的研究

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1、多糖合剂的制备及质量鉴定的研究Studyonpreparationandqualityevaluationofmixtureofpolysaccharides作者姓名：叶伶艳专业名称：劳动卫生与环境卫生学指导教师：吕春平教授学位类别：医学硕士答辩日期：2015年5月27日中文摘要多糖合剂的制备及质量鉴定的研究多糖又称多聚糖，广泛存在于植物、动物、微生物和海洋生物等生物机体中，是生物体内除蛋白和核酸以外一类重要信息分子。多糖具有多种生物活性：抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、抗菌、免疫调节、抗凝血、降血糖、降血脂、抗过敏、抗炎和抗病毒等。每一种多糖均具有其特有

2、的生物活性，如果将几种多糖联合应用，可能使其具有多种生物活性，在预防和治疗疾病方面将起到非常重要的作用，因此，多糖合剂的研究与开发具有重要的理论意义和应用价值。本文以水提醇沉法从人参、松茸和香菇中分别提取多糖，经过Sevag法脱蛋白、氧化法脱色素分离纯化后，获得精制多糖，制备多糖合剂，采用CTL毒活性试验，通过正交试验确定多糖合剂的最佳组方，即人参多糖:松茸多糖:香菇多糖(1:1:1)，三种多糖浓度均为200mg/L。本文对人参多糖、松茸多糖、香菇多糖及多糖合剂进行质量鉴定的研究：(1)人参多糖、松茸多糖和香菇多糖的提取率分别为8.85%、9.40

3、%、10.5%；(2)采用苯酚-硫酸法，对多糖中总多糖含量进行测定，人参多糖、松茸多糖、香菇多糖和多糖合剂中总多糖含量分别为62.96%、59.13%、33.86%和53.17%；采用间羟基联苯法，对多糖中糖醛酸含量进行测定，人参多糖、松茸多糖、香菇多糖和多糖合剂中糖醛酸含量分别为16.44%、9.37%、4.47%和9.54%；采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS)，对多糖中还原糖含量进行测定，人参多糖、松茸多糖、香菇多糖和多糖合剂中均不含有还原糖；多糖样品经过前处理后，采用DNS法，对多糖中淀粉含量进行测定，人参多糖、松茸多糖、香菇多糖和多糖合剂

4、中淀粉含量分别为7.26%、2.80%、3.77%和3.94%。(3)采用液质联用色谱法，对人参多糖、松茸多糖和香菇多糖中单糖组分进行分析，人参多糖由D-葡萄糖、D-阿拉伯糖、鼠李糖3种单糖组成，摩尔比为62.85:3.23:0.79；松茸多糖由D-葡萄糖、D-阿拉伯糖、D-木糖3种单糖组成，摩尔比为115.50:0.20:0.27；香菇多糖由D-葡萄糖、D-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露糖、果糖5种单糖组成，摩尔比为3.15:0.16:0.18:3.42:2.27。I(4)采用凝胶渗透色谱法，对人参多糖、松茸多糖和香菇多糖分子量及分布6554进行测

5、定，人参多糖含有重均分子量为2.08×10、5.52×10、1.44×10、1.87×10、32653.38×10和5.48×10的多糖成分；松茸多糖含有重均分子量为2.59×10、1.39×10、4423.69×10、1.16×10、4.83×10、和6.30×10的多糖成分；香菇多糖含有重均分子量65542为1.89×10、3.21×10、1.09×10、2.26×10、和5.22×10的多糖成分。对人参多糖、松茸多糖、香菇多糖和多糖合剂进行稳定性研究，在高温条件下，总多糖含量下降未超过7%；在强光照条件下，总多糖含量下降超过10%，说明多糖应

6、该避光保存；在高湿度条件下，吸湿增重超过14%以上，说明多糖容易吸湿，应该密闭干燥保存。在加入不同pH溶液、氧化剂(H2O2)和还原剂(Na2SO3)后，人参多糖、松茸多糖、香菇多糖和多糖合剂溶液的吸光度值没有明显变化，表明它们均有较好的酸碱稳定性和抗氧化还原性。对人参多糖、松茸多糖、香菇多糖和多糖合剂进行卫生学检测，人参多糖、松茸多糖、香菇多糖和多糖合剂中菌落总数分别为120、0、0和50CFU/g；人参多糖、松茸多糖、香菇多糖和多糖合剂中均未检出大肠埃希菌、沙门氏菌、志贺菌、金黄色葡萄球菌，均符合2010版《中国药典》微生物限度标准。关键词：多

7、糖；合剂；质量鉴定；稳定性研究；卫生学检测IIAbstractStudyonpreparationandqualityevaluationofmixtureofpolysaccharidesPolysaccharideswasalsoknownassaccharin,widelyfoundinplants,animals,microorganisms,marineorganismsandotherbiologicalorganism,isanimportantinformationmoleculesinadditiontoproteinandnuc

8、leicacidinorganisms.Polysaccharideswithmanykindsofbiologicala