多种营养素对燃煤型氟中毒雌鼠卵巢颗粒细胞凋亡干预作用研究

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1、參位代码：10660中图分类号：R599.9学号：10660S120151UDC：615.9密级：公幵学科专业代码：100208贵阳医学院2015届硕士学位论文(科学学位）多种营养素对燃煤型氟中毒雌鼠卵巢颗粒细胞凋亡干预作用研究Studyoninterventioneffectsofvariousnutritionalfactorsontheapoptosisofovariangranularcellscausedbycoal-bumingfluorosisinfemalerats研究生：邹文兵导师：夏曙华教4受年鍊••2〇12

2、级专业：临床检验诊断学二〇一五年五月贵阳医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作取得的成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。除与外单位合作项目将予以明确方式规定外，本砑究已发表与未发表成果的知识产权均归属贵阳医学院。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。l年孓月»h学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向

3、国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权贵阳医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或拉描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于〔请在以飞相应方框内打1、保密□，在_年解密后适用本授权书。2、不保密dX，<：年r月nFi年_1月创中图分类号：R599.9单位代码：10660UDC：615.9学号：10660S120151学科专业代码：100208密级：公开贵阳医学院2015届硕士学位论文（科学学位）多种营养素对燃煤型氟中毒雌鼠卵巢颗粒细胞凋亡干预作

4、用研究Studyoninterventioneffectsofvariousnutritionalfactorsontheapoptosisofovariangranularcellscausedbycoal-burningfluorosisinfemalerats论文作者：邹文兵指导教师：夏曙华教授申请学位：医学硕士培养单位：医学检验学院学科专业：临床检验诊断学研究方向：地方病与生殖医学研究起止日期：2012年6月至2015年7月论文评阅人：盲评答辩委员会主席：谢东主任医师论文答辩日期：2015年5月21日二〇一五年五月多种营

5、养素对燃煤型氟中毒雌鼠卵巢颗粒细胞凋亡干预作用研究专业：临床检验诊断学硕士研究生：邹文兵导师：夏曙华【摘要】目的：探讨钙、镁、锌、铜、维生素D与蛋白质对燃煤型氟中毒雌鼠卵巢颗粒细胞凋亡的干预作用及可能机制。方法:1.将SD雌性大鼠120只随机分为对照组、染氟组、多维元素干预组、多维元素加蛋白干预组，每组30只，自由食用添加钙、镁、铜、锌、维生素D和强化大豆不同配方的织金病区原煤加拌泥煤烘烤的玉米饲料构建动物模型；2.动态观察雌鼠染氟期间牙齿的变化情况；3.采用离子选择电极法、高温灰化-氟离子选择电极法测定雌鼠尿氟、骨氟含量；4.

6、于不同时间段（60d、120d、180d）动情期处死雌鼠，分离卵巢。①采用比色法测定雌鼠新鲜卵巢组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的含量；②电镜下观察卵巢组织超微结构；③原位末端标记（TUNEL）法检测卵巢颗粒细胞凋亡率；④免疫组化法检测卵巢颗粒细胞凋亡相关因子Fas、Caspase-3的表达情况。结果：1.成功建立燃煤型氟中毒雌鼠模型和干预模型。2.染氟时间相同的组别，雌鼠卵巢SOD活性为对照组>多维元素加蛋白干预组>多维元素干预组>染氟组（P<0.05），雌鼠卵巢MDA含量为染氟组>多维元素干预组>多维元素加蛋白

7、干预组>对照组（P<0.05）；3.卵巢超微结构显示颗粒细胞凋亡现象：对照组和两干预组未见，染氟组出现，随时间延长，凋亡加重；4.染氟时间相同的组别，雌鼠卵巢颗粒细胞凋亡率为染氟组>多维元素干预组>多维元素加蛋白干预组>对照组（P<0.05），随时间延长，仅染氟组60d与180d比较有统计学意义（P<0.05）；5.染氟时间相同的组别，雌鼠卵巢颗粒细胞Fas、Caspase-3蛋白表达量均为染氟组>多维元素干预组>多维元素加蛋白干预组>对照组（P<0.05），随时间延长，染氟组、多维元素干预组、多维元素加蛋白干预组雌鼠Caspa

8、se-3蛋白表达量逐渐降低，除多维元素加蛋白干预组120d与180d比较无统计学意义，其余各组各时间点比较均有统计学意义（P<0.05）。结论：1．过量氟可诱导卵巢颗粒细胞发生凋亡，而氧化应激促进凋亡相关因子Fas表达和激活Caspase-3蛋白表达可能是氟诱导