多种营养素干预燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢生殖功能影响

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1、中图分类号：R599.9单位代码：10660UDC：615.9学号：10660S120155学科专业代码：100208密级：公开贵阳医学院2015届硕士学位论文(科学学位）多种营养素干预燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢生殖功能影响Effectsofavarietyofnutritionalfactorsinterventionfluorosisofcoalburningonreproductivefanctionoffemalerats研究生:王飞清导师:夏曙华教授年级:2012级专业：临床检验诊断学二〇一五年五月贵阳医学院学位论文原创性声明本人

2、郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。除与外单位合作项目将予以明确方式规定外，本研究已发表与未发表成果的知识产权均归属贵阳医学院。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。2^3_年上月>^B^0年上月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被

3、查阅和借阅。本人授权贵阳医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于（请在以下相应方框内打“V”）：1、保密□，在__年解密后适用本授权书。2、不保密S/年S月年月円中图分类号：R599.9单位代码：10660UDC：615.9学号：10660S120155学科专业代码：100208密级：公开贵阳医学院2015届硕士学位论文（科学学位）多种营养素干预燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢生殖功能影响Effectsofavarietyofnutritionalfac

4、torsinterventionfluorosisofcoalburningonreproductivefunctionoffemalerats论文作者：王飞清指导教师：夏曙华教授申请学位：医学硕士培养单位：贵阳医学院研究生院学科专业：临床检验诊断学研究方向：生殖医学与地方病研究起止日期：2012年6月至2014年12月论文评阅人：盲评答辩委员会主席：谢东主任医师论文答辩日期：2015年5月21日二〇一五年三月多种营养素干预燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢生殖功能影响专业：临床检验诊断学硕士研究生：王飞清导师：夏曙华【摘要】目的：探讨钙、镁、铜、

5、锌、维生素D和大豆干预燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢生殖功能影响及其干预可能机制。方法：1.采用自由食用添加钙、镁、铜、锌、维生素D和大豆不同配方的织金病区原煤加拌泥煤烘烤的玉米饲料构建动物模型；2.动态观察雌鼠染氟期间牙齿的变化情况；3.采用离子选择电极法、高温灰化-氟离子选择电极法测定雌鼠尿氟、骨氟含量；4.分离卵巢：①称重，计算卵巢的脏器系数。②电镜下观察卵泡组织超微结构及颗粒细胞凋亡情况。③用免疫组化法观察卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。④HE染色光镜下观察卵巢组织形态、各级卵泡及黄体的数量变化。5.于不同时间段（60

6、d、120d、180d）的动情期处死雌鼠，采用股动脉取血法收集雌鼠血液，分离血清，采用放射免疫法检测血清中雌二醇（E2）含量；结果：1.成功复制染氟组和干预组动物模型；2.随着染氟时间的延长，雌鼠氟斑牙症状逐渐加重，干预组出现轻度氟斑牙，且多种元素+大豆干预组氟斑牙的发生较多种元素干预组轻；3.染氟时间相同的组别（60、120、180d）：染氟组雌鼠尿氟、骨氟含量均高于对照组，有统计学意义（P＜0.05），且染氟组、两干预组雌鼠的尿氟逐渐增加，且后者明显高于前者，均有统计学意义（P＜0.05）；与染氟组比较，两干预组雌鼠的骨氟逐渐降低，

7、有统计学意义（P＜0.05）；各组内比较：随着时间的延长，尿氟含量均逐渐增加，各组尿氟含量间均有统计学意义（P＜0.05）。染氟组骨氟含量逐渐增加均有统计学意义（P＜0.05）；两干预组骨氟含量均逐渐降低，多种元素干预组仅60d、120d骨氟含量与180d有统计学意义（P＜0.05），多种元素+大豆干预组骨氟含量均有统计学意义（P＜0.05）；4.染氟组卵泡组织超微结构出现颗粒细胞、基质细胞凋亡；两干预组在早期仍可见较明显的超微结构损害，随干预时间延长，与染氟组比较，两干预组雌鼠卵巢颗粒细胞和基质细胞超微结构均基本正常，未见凋亡样改变。

8、添加蛋白质干预表现为卵巢超微结构脂滴明显少于多种元素干预组。5.卵巢颗粒细胞Bax蛋白表达量，染氟120d、180d染氟组明显高于对照组、两干预组，均有统计学意义（P＜0.05）；多种元素+大豆干预组低于多