复合脂肪干细胞的微米纱补片的实验研究

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1、上海交通大学硕士学位论文复合脂肪干细胞的微米纱补片的实验研究作者姓名：侯旻作者学号：1127259569指导老师：吴氢凯教授专业：妇产科学培养单位：上海交通大学附属第六人民医院答辩时间：2015年4月上海交通大学医学院2015年04ADissertationSubmittedtoShanghaiJiaoTongUniversityforMasterDegreeofScienceExperimentalresearchinmicroyarnscaffoldsco-combinedwithrabbitadiposestemcellsAuthor:MinHouStuden

2、tNO:1127259569Advisor:Prof.Qing-KaiWuSpecialty:ObstetricsandGynecologyCultivationUnit:ShanghaiJiaoTongUniversityAffiliatedSixthPeople’sHospitalThesisdefensetime：April,2015SchoolofMedicineShanghaiJiaoTongUniversityApril12th,2015上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中

3、已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。上海交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在_____年解密后适用本授权书。本学位论文属于摘要复合脂肪干细胞的微米纱

4、补片的实验研究摘要研究目的：比较静电动态液体纺纱法制备的大孔径、高孔隙率的TPU/P(LLA-CL)微米纱支架和传统静电纺丝制备的TPU/P(LLA-CL)纳米纤维支架的表征，包括两种支架的表面形貌、力学性能等；研究两种支架材料与兔脂肪干细胞构建女性盆底组织工程网片的生物相容性。研究方法：1、TPU/P(LLA-CL)微米纱和纳米纤维支架的制备和表征测试：将TPU/P(LLA-CL)按照质量比例为100/0，75/25，50/50，25/75，0/100溶解于六氟异丙醇，分别采用静电动态液体纺纱技术制备复合微米纱支架、传统静电纺丝技术制备复合纳米纤维支架；应用扫描电

5、子显微镜观察两种支架的形貌，计算两种支架材料的纤维直径、孔隙率和孔径的大小；应用万能材料测试机检测两种支架的力学性能；应用傅里叶红外光谱分析不同比例的支架材料的表面化学性能。2、TPU/P(LLA-CL)微米纱和纳米纤维支架复合兔脂肪干细胞构建盆底组织工程补片：分离兔脂肪干细胞，慢病毒介导转染EGFP对细胞进行标记；将每种支架制备成0.5cm×0.5cm大小的样本，共分为微米纱、I摘要纳米纤维和对照组三组（n=3）；将兔脂肪干细胞接种在三组的样本上，通过扫描电子显微镜、倒置荧光显微镜、CCK-8实验法等方法检测兔脂肪干细胞在两种支架表面的黏附、生长和增殖情况；组织学

6、切片HE染色分析细胞长入支架的情况。研究结果：1、微米纱粗细不均，表面粗糙，纳米纤维支架的纤维粗细均匀，表面光滑；微米纱的平均直径约为14.05±2.21µm，纳米纤维的平均直径约为1.132±0.18µm，差异具有统计学意义（P0.05）；微米纱支架的平均22孔径（550.78±142.60μm）明显大于纳米纤维支架（69.05±19.18μm），差异具有统计学意义（P0.05）；微米纱支架孔隙率（79.09±3.22%）明显高于纳米纤维支架（61.8±1.64%），差异具有统计学意义（P0.05）。同一种质量比例的TPU/P(LLA-CL)微米纱和纳米纤维

7、支架力学性能差异无统计学意义（P0.05）。微米纱支架，TPU/P(LLA-CL)为50/50时断裂应力最大（11.5±3.43Mpa），与天然阴道壁组织力学性能最接近。五种不同比例的纳米纤维支架，随着TPU比例的增加，断裂应力随之增大。微米纱支架和纳米纤维支架表面TPU和P(LLA-CL)没有发生化学反应。2、CCK-8试验显示接种细胞1d后，三组之间吸光度值无明显差异，差异无统计学意义（P=0.806）；接种细胞后4d，微米纱支架上的吸光度值大于纳米纤维支架和空白板的吸光度值，但差异无统计学意义（p=0.083），随着培养细胞时间的延长，三组在接种细胞7d