四种鹅球虫18s与its rdna序列的克隆及系统发育分析

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1、■‘Ii、'、?‘,、巧吉Tf子 ̄二、?去:*??-、?、、、、?*、*■'?'占????^苦壤叫义參纔"—-郑=-、式心*.S‘*二^硕击学佐冶文.\^苗^..卢'缘.*—八蠻\/'"(学术型)>rV.^种觀球虽8S与ITSrDNA序列的克隆及系统发育分祈1朱.1態;秘感如一'.一-。、、-.公’.y):v糸‘■。^:陶建平放授,扬州大學,江苏扬州,225009_:i指导教师姓名*?:预防兽医学硕壬学科专业名称_申请学位级别;、

2、2015年6月论文提交日期:2015年4月论文答辩日期;'学位授予单位;抵州大学学位授予日期:_'委员会主席:_—-."‘--严考馬.;:;.玄如X、媒平卷15年6月參索與%甚贊:苗'‘./.‘&振护:、終若巧;轉P.'.、.V.沁穩.象—-?".-.‘六%參/雜‘戶:^作社:..;乂礙若公;古r朱水明:四种携辣虫18S与ITSDNA序巧的克隆及系统发育分析I四种鷄球虫18S与ITSrDNA序列的克隆及系统发育分析中文摘要一erifo豬球虫是类寄生于家觀及雁形目(An

3、srmes)鸟类的消化道或肾脏细胞的寄生性原虫,在分类上隶属复顶亚口(Apicocomplexa)、抱子虫纲(Sporozoa)、真球虫目(Eumeriina)、艾美耳科(Eimeriidae),呈世界性分布。總球虫种类众多,临床上多为海合感染,传统分类方法鉴别难度较大。本研巧采用单卵囊分离方法建立了鶴艾美耳球虫’広多斑艾■mow(巧wmaawe地)、赫尔曼艾美耳球虫(美耳球虫化5咕)和金/va)4ISSDNA及ITSrDNA黄艾美耳球虫與等种瓣球虫纯种株,对其r序列进行了克隆与序列分析,并分析了鸦球虫与其他

4、动物球虫间的系统发育关系,旨在分子水平对鶴一。球虫作进步鉴别分析,为鶴球虫的分子鉴别诊断和分子流行病学调查奠定基础1、扬州地区鹤球虫的流行病学调查、江、3采用形态学分类方法,对扬州的高邮都巧江、仪征、宝应等不同地区的6个碟群进行磯球虫检查,感染球虫的鶴群为巧个,感染率为90.47%;3周龄W内鷄群的球?虫感染率最低.66%1。,感染率为66,39周龄球虫感染率最高,感染率为00%不同地区總韓均检测到有较高的球虫感染率,其中巧江、仪征、宝应3地的磯群球虫感染率均高达100.00%。猶球虫多为混合感染,泡

5、合感染率为85.96%。共检到1科2属6种球虫,其中’’艾美耳属(抓wenfl)5种:猶父美耳球虫(反wwens)、赫尔曼艾美耳球虫化Aww口口0、■金黄艾美耳球虫(E/vo)、有毒艾美耳球虫Mocms)、多斑艾美耳球虫(£15woso)典確;’泰泽属(巧zzma)1种;稍小泰泽球虫其中稍小泰泽球虫和赫尔曼艾美耳7460%65.08%。球虫为优势种,其感染率分别为.和2、四种觀球虫的分离鉴别与纯种株的建立采用单卵囊分离技术,获得了4株纯种鶏球虫,并鉴定为黯艾美耳球虫、赫尔曼艾美耳球虫、多斑艾美耳球

6、虫与金黄艾美耳球虫。主要鉴定指标如下:。,鷄艾美耳球虫;潜在期6d左右,幼鶏临床症状明显,部分幼鹤死亡卵囊呈梨形前端异常狭窄,色,厚度约叫m,囊壁光婿,卵囊壁为单层结构,无,有卵膜孔无极帽,??抱子囊为卵圆形,有抱子囊残体,卵囊大小为(18.522.7)LimX(14.119.3)nni。||赫尔曼艾美耳球虫:潜在期4d左右,幼鶏临床症状不明显。卵囊呈卵圆形,卵囊壁为双层结构,无色,较厚,囊壁光滑,有卵膜孔,无极帽,抱子囊为卵圆形,斯氏体不明n扬州大学硕去学位论文??显,卵囊大小为(24.02

7、7.6)umX(17.5巧.5)叫n。|d多斑艾美耳球虫:潜在期4.5左右,幼猶临床症状不明盈。卵囊呈宽卵圆形,黄褐?两端比侧面厚色,卵囊壁厚度为1.2,囊壁表面有斑点,有卵膜孔,无极帽,袍??子囊为卵圆形,抱子囊残体为细小的颗粒,卵囊大小为(19.723.3)imX(14.119.3)^m。p金黄艾美耳球虫:潜在期7d左右,幼鷄临床症状较明显,无幼猶死亡。卵囊呈宽卵圆形一,黄褐色,卵囊壁为双层,外层有交叉的条纹,泡子化卵囊的窄端有个大的折光颖粒,拖子囊有斯氏体,每个拖子囊含有粗大颗粒状的残体

8、,有卵膜孔,无极帽,抱子囊残?X?体为细小的颗粒,卵囊大小为(25.632.4)阳q(20.225.2)叫n。3、四种鹤球虫18S区序列的克隆与序列分析8S一在分析了多种艾美耳球虫1rDNA序列的基础上,设计对艾美耳属球

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