呋喃丹对斑马鱼（danio rerio）的生殖内分泌干扰效应研究

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1、？相料义々ＮｉｉＸｉ（Ｘ：ＥＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＣＨＩＮＡ硕±学位论文ＭＡＳＴＥＲＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ’嘛巧巧对斑马鱼（ＤａｗｏＷＨＯ）的论文趣目：生巧内分泌干犹效应研究Ｔｈｅｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｅｎｄｏｃｒｉｎｅｄｉｓ化ｒｂｉｎｇｅｆｅｃｔｓ’？英文巧目：ｏｆｃａｒｂｏｆｕｒａｎｏｎｚｅｂｒａｆｉｓｈ／）ａｗ０化＂〇）（作者：岳咖ｔ指导教师：王巧助教授、学位类别：全日制专业学位专业名巧：生物工程研巧方向：生态毒

2、理道心义此论文献给所有支持和帮助巧的人。—岳晴请．’Ｉ■－‘胡化〇＇．‘；＂川＂，泌ｒｗｒ化喃ｕ４！；．（阿Ｉ；相１；刑Ｉｖｊ化卸：化’巧瞒丹对巧马鱼（公Ｗ／７０）的生殖内分泌干犹效应研究Ｖ少．学位论文答辩日期：父２？指导教师签字：支而浦员会成员签字：藻心成疆＇＇＇化喃巧＂巧Ｉｎ，＂ｊｉ化ｎ）的牛．辦内，泌ｒ化巧化独彻汚明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研巧工作及取得的。研究成果据我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己

3、经发表或撰写过的研巧成果，也不包含未获得（或其１一他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：＾？签字日期：＾化年＾月文曰］（学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并。向国家有关部口或机构送交论文的复印件和巧盘，允许论文被査阅和借阅本人授权学校可，可＾采用１＾１将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息

4、研巧所将本学位论文收录到《中国学位论文全文巧据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解巧后适用本授权书）学位论文作者签名：ｉ４导师签字：巧少＾？签字日期Ｖ日签字日期：年月３：＞作年《月’■Ｉ＇Ｉ灯蜗＞ｍｕ：化］！鱼ｒｉｏＷ巧ｉ（Ｏｎｗｌ的１．柏内外ｒ化巧帖研％’’０？＊＊快喃丹对斑马鱼（公１０／６１１０生巧内分泌干扰效应研究）的摘要巧喃丹是一种高毒的务基甲酸酷类农药，能够引起大鼠附睾、精堯、前列腺一、等器官重量降低，跑蝴幼虫贈化数减少精子晴形、受精能力丧失等系列生殖损

5、伤。为了确定巧喃丹对鱼类的生殖内分泌干扰效应，本文选用斑马鱼作为实验动物，检测了肝脏卵黄原蛋白（Ｖｉｔｅｌｌｏｇｅｎｉｎ，ＶＴＧ）、整鱼性激素１７片雌二醇＇ｆ－ｅｓｒａｄｉｏｌ、５〇８６１〇１１６、ＰＴＧ基因、１７ｔＥ１１（，；睾兩批，性腺芳香化巧基因））。含量及雌激素受体（ｅｓｔｒｏｅｎｒｅｃｅｔｏｒｓＥＲｓ、ａｎｄｒｏｅｎｒｅｃｅｔｏｒｇｐ，）雄激素受体（ｇｐ，ＡＲ基因表达水平等多个指巧，探讨了巧喃丹对雌性和雄性斑马鱼的生殖内分泌）干扰效应及机制。本文研巧结果表明：１、１．０、１化０、ｌＯＯ．Ｏ／Ｌ巧喃丹

6、暴巧雄性斑马鱼２，（０化Ｕｇ１天后采用巧抗夹－ｎ也ＥＬＩＳＡ法巧ｎｚｍｅｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｓａｎｄｗｉ沈ｔｅｃｈｉｑｕｅ检测肝脏ｙｙ）ＶＴＧ含量，放射免疫分析巧Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ，ＲＩＡ）检测了整鱼性激素含量，实时定量ＲＴ－ＰＣＲ方法检测了肝脏ｍ；、性腺芳香化巧基因ＣＴ／Ｖ始／〇、肝脏和性腺雌激素受体基因基因表达水平。结果表明：〇．１＾ｌｇ／Ｌ处理组ＶＴＧ含量上升，所＾７基因表达量均升商．０、１化〇、１００．０ｌ／Ｌ有巧喃丹处理组肝脏；１处理组Ｅ２＾ｇＣＴＰ／如

7、／ａ基因表达量较对照含＊显著上升，Ｔ含量显著下降；而各处理组性腺组均无显著性变化；所有处理组肝脏扮资２及性腺￡／？〇、￡飾／、￡飾２的表达水平显著上调。表明巧喃丹可升商巧鱼６２含量，上调椎激素受体Ｅ化基因的表达，从而诱导雄性斑马鱼产生ＶＴＧ，发挥巧满：素效应。而巧鱼Ｅ２含＊显著升巧和Ｔ含量显著降低并不是由于巧喃丹巧咱基因表达所致。快喃丹暴巧对性成热雄性斑马鱼的性巧指数（ｇｏｎａｄｏｓｏｍａｔｉｃｉｎｄｅｘ，ＧＳＩ）无显著性巧响。２０．１、１．０、１０．０、１００．０ｌ／Ｌ巧喃丹暴ｉＳ惟性斑马鱼２１天后，采用ＲＩＡ检

8、（）＾ｇＲＴ－ＰＣＲ方法检测了性腺芳香化酶基因测了整鱼性澈素含量，实时定量巧’Ｇ基因表达肝脏巧激素受体基因、性巧巧教巧受体及肝脏水平。所得