久效磷对斑马鱼（danio rerio）胚胎发育的毒性效应及其机制研究

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1、呼间ｉ各；义々＾ｆＯＣＥＡＮＵＮＩＴＹＣＨＮＡＩＶＥＲＳＯＦＩ硕±学位论文ＭＡＳＴＥ民ＤＫＳＥＲＴＡＴＩＯＮ‘’久效權对斑马鱼（Ｚ）ａｗ０ｒｍ０）胚胎发育的论文题目：奉性效应及其机制研究ＥｆｆｅｃｔｓａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｍｏｎｏｃｒｏｔｏｈｏｓｏｎｐｔｈｅｄｅｖｅｌｏｍｅｎｔｏｆｚｅｂｒａｆｉｓｈＤａｎｉｏｒｅｒｉｏｐ｛）英文题目；ｅｍｂｒｙｏｓ作者：张晓雪指导教师：汝少国教授：学位类别全日制学术学位．

2、专业名称：生态学硏究方向：污染生态学―一‘谨於此论文献给所有关心和爱护我的人—张晓雪久效麟对斑马鱼ｒｅｒ沁胚胎发育的毒性效应及）其机制研究学位论文答辩日期：之指导教师签字：答辩委员会成员签字：妻心、—狡么独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得（。与＾或其他教育机构的学位或证书

3、使用过的材料＿我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：若签字日期：年ｔ月２＾日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，并同意Ｗ下事项；１、学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。２、学校可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采＂用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学中＂国学术期刊（光盘版）电子

4、杂志社用于出版和编入獻ＫＩ《中国知识资源总库》，授权中国科学技术信息研充所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名；蘇蕾导师签字；０＾玄签字日期：：年ｒ月日签字日期；２／］年ｒ月日久效雜对斑马鱼（。０？如胜胎发育的毒性效应及其机制研究摘要有机稱农药具有一定的巧胎毒性，能够影响胚胎的发育。实验室之前的研究发现久效磯暴露斑马鱼胚胎能够影响其生殖腺的发育，导致卵巢内生殖细胞形态一和排列的异常。为进步探巧久效

5、憐对斑马鱼胚胎发育的毒性效应，本文统计分析了久效磯对斑马鱼胚胎存活率、包囊肿和骨骼弯、解化率、也跳、崎形情况（屯曲）、运动行为（自发运动）Ｗ及生长水平（头长和体长）的影响，首先从个体水平上探讨了久效磯的胚胎毒性。多种基因参与调控了斑马鱼化胎的发育，久效憐暴露斑马鱼导致的也包囊肿、脊柱弯曲和性腺结构异常可能是因为其影响了发育相关基因的表达，而外源物质能够通过改变基因启动子区的甲基化水平来影响基因一、巧巧的表达。因此，本文进脏发育基因、步研究了久效磯暴露斑马鱼胚胎对屯）（肌肉发育基

6、因（Ｍｇ／２ｃ）和性腺发育基因（府ｍＲＮＡ表达水平的影响，Ｗ及久效憐暴露斑马鱼对防ｓａ基因启动子区甲基化水平的影响，从分子水平探讨了久效憐对斑马鱼胚胎发育毒性的潜在机制。本文研究结果表明：１０．４／Ｌ６ｈ．０００４、０．００４、０．０４和０ｍ的久效磯暴露斑马鱼胚胎至９ｆｈｏｕｒ（）ｇｐ（ｏｓｔｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ、＾ｐ，对胚胎的存活率死亡率、头长、体长Ｗ及自发运动均无显著）影响６ｈ、。久效磯暴露显著降低了３ｐｆ斑马鱼胚胎的也跳，升高了９加ｐｆ仔鱼屯包囊肿和脊柱弯曲的

7、百分比，说明久效稱具有胚胎毒性，主要表现为致崎性，能够影响斑马鱼屯、脏和骨骼的发育。２００００４、０４、０４和０４ｍＬ的久效磯暴９６ｈ．．００．０．／露斑马鱼胚胎至ｆ，采用（）ｇｐ－４８、实时定量ＰＣＲ（ｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ）检测和６０ｈｐｆ屯脏发育相关基因Ｔ盒子２化巧）、（肌细胞増强因子２Ｃ（Ｍｇ／２ｃ），Ｗ及４８、６０和９６ｈｐｆ性腺发育相关基因－把－府Ｓ口ＤＥＡＤｆａｍｉｌｒｏｉｎｏｆＡＴＰｄ巧ｅｎｄｅｎｔ民ＮＡｈｅｌｉｃａｓｅ）ｍ艮ＮＡ的表达水平。研（ｙｐ

8、究结果表明，久效憐暴露降低了４８ｈｐｆ胚胎７ｆｅｃ２基因的表达水平，而对６０ｈｐｆ化胎基因表达水平无影响：暴露升高了４８ｈｐｆ化胎Ｍｇ／九基因的表达水平，但是，对６０ｈｐｆ胚胎基因表达水平无影响，说明久效磯可能是通过影响ｒｆｅｃ２和峰脚基因在也脏发育关键期内４８ｈｆ、（ｐ内）的表达水平，进而影响屯脏的正常发育。另外９化（，久效磯暴露对９胚胎化ｗ基因表达水平无影响，但降低了４８和Ｗｈｐｆ胚胎化Ｍ基因的表