双酚a对斑马鱼（danio rerio）雌激素效应的dna甲基化机制研究

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1、义考變）呼奶ＯＣＥＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＣＨＩＮＡ博±学位论文ＤＯＣＴＯ民ＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ’’双齡Ａ对斑马鱼（Ｚ）幻ｎｚ０化ｎｏ）雌激素论文题目：效应的ＤＮＡ甲基化机制研究ＴｈｅＤＮＡｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ化ｅｅｓ吐ｏｇｅｎｉｃｅｆｅｃｔｓｏｆｂｉｓｐｈｅｎｏｌＡｏｎ’英文题目’：ｚｅｂｒａｆｉｓｈＺ）幻ｗ０化ｒ／ｏ（）作者：赵飞指导教师：汝少国教授田华副教授学位类别；全日制学术学位专业名称：生态学研究方向：生

2、态霉理学－＾ｎＰｒＴｉＳＶＩｒｉ：？．Ｔ＞Ｉ谨心乂此论文献给我的导师、家人和朋友。赵飞双齡乂对斑马鱼（。＂＂如雌激素效应的ＤＮＡ甲基化机制研究学位论文答辩日期：乏氏智指导教师签字：４）：Ｗ１答辩委员会成员签字＿—／、建１诚二￣—ｃ＾ｆ，＿養旅為独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研巧工作及取得的，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外研巧成果。据我所知，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研巧成果，也不包含未获得ｉ１或其他教育机构的学位或证书使用过的材料一。与我同

3、工作的同志对本研巧所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：从《年ｆ月＾日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人．授权学校可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）

4、学位论文作者签名；导师签字：廣吁签字日期：＞月日签字日期：从／年＾月／＾；年安勺＾＇切齡Ａ对斑叫鱼ｆｌｗＨｏｗ如化的ＤＮＡ１１（）雌激索巧｜堪化机制研化’双齡Ａ对斑马鱼（Ｚ）ａｗ０雌激素效应的ＤＮＡ甲基化奶制研究摘要一双酪Ａ是世界上产量最大的化学品之，在水环境中的浓度能够达到２？１１７３０Ａ＾ｉｇ／Ｌ对水生生物和生态系统的健康具有潜在的风险。研究表明双酪等环境雌激素主要通过与雌激素受体（ｅｓｔｒｏｇｅｎｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ＥＲｓ）结合或千扰內源雌激素水平两种途径发挥雌激素效应，这两种途径均涉及多种基因表达水平的奈乱

5、，但双酶Ａ干扰基因表达的深层分子机制并不清楚５００￣１５０Ｌ。本研究采用０ｉ／双＾ｇ？－－龄Ａ暴露斑马鱼２１ｄ或全世代１５１５０ｄｈ，Ｗ血浆１７雌二醇７ｅｓｔｒａｄｉｏｌＥ（ｐ）０ｙｐ，２）水平、雄鱼巧脏卵黄原蛋白ｖｉｔｅｌｌｏｅｎｉｎＶＴＧ合成、Ｆ１（ｇ，）代繁殖能力及子代发育水平、Ｆ１代性别比例为指标，在分子、细胞和个体水平系统研究了双敵Ａ对斑马鱼的雌激素效应，并从靴器官基因和性腺Ｅ２合成相关基因表达的角度阐述了双龄Ａ雌激素效应的分子机制一；为进步研究双酪Ａ改变基因表达水平的作用机理，本研究对组织ｇＤＮＡ和基因ＣｐＧ位点的甲基化水平进

6、行了检测，从ＤＮＡ甲基化调控基因表达的角度深入探讨了双献Ａ发挥雌激素效应的机制。研究结果表明：１双联Ａ暴露２１ｄ５００（，和１５００＾ｉｇ／Ｌ双酪Ａ暴露显著升高雄鱼血浆６２含）Ｌ双ＥＡ？量、１０００ｌ／Ａ显著降低２含量全世代（１５１５０ｄｈ暴露后，＾ｇ献，双酪ｐ）各暴露组雌鱼血浆Ｅ２含量无显著变化、雄鱼血浆Ｅ２含量在ｌＯＯＯ＾ｇ／Ｌ暴露组显著升高；暴露２１ｄ，雄鱼肝脏雌７ｍＲＮＡ水平和ＶＴＧ蛋白含量在５００和１５００惦／Ｌ５００？暴露组显著升高，在１０００＾１８／１＾暴露组无显著变化；全世代暴露后，１５００ｉ／Ｌ＾ｇ双酪Ａ均显著升高Ｆ

7、１代雌鱼卵巢闭锁卵泡比例，１０００和１５００＾ｇ／Ｌ双酸Ａ显著Ｆ降低１代雌鱼平均产卵量和Ｆ２代７２ｈｆ解化率、显著升高Ｆ２代１２ｈｐｆ死亡率ｐ；￣５００１５００ｉｇ／Ｌ双酪Ａ暴露全世代均显著升高了雌鱼比例。双酪Ａ暴露増加了雄＾鱼血浆Ｅ２含量、诱导了雄鱼肝脏ＶＴＧ的合成、抑制了亲代繁殖和子代发育水平，并诱导了雌雄性别化例失调，能够对斑马鱼产生多种雌激素效应。（２）双酪Ａ暴露２１山雄鱼肝脏基因表达水平仅在１０００＾ｉｇ／Ｌ暴露组显著升高，贷？片／基因表这水平在各个暴露组均显著升离，￡７？片２基因表达水平无显Ｉ＇＇｜ｗＨ？Ｗ