刺梨联合金荞麦提取物对人慢性粒细胞白血病k562细胞的影响

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1、分类号：R557单位代码：10719学号：12147031密级：延安大学论文题目：刺梨联合金荞麦提取物对人慢性粒细胞白血病K562细胞的影响论文作者：王圆指导教师、职称：葛繁梅主任医师学科、专业名称：内科学提交论文日期：二○一五年六月创新性声明本人声明所呈交的论文是个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢中所罗列的内容以外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果；也不包含为获得延安大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究

2、所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。本人签名：日期：关于论文使用授权的说明本人完全了解延安大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属延安大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位仍然为延安大学。学校有权保留送交论文的复印件，允许查阅和借阅论文；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以允许采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。（保密的论文在解密后遵守此规定）本学位论文属于保密

3、在年解密后适用本授权书。本人签名：日期：导师签名：日期：缩略词表（Abbreviations）英文名称简写英文名称全拼中文名称CLExtractofRosaroxburghiiTratt刺梨提取物FRExtractofFagopyrumcymosum金荞麦提取物CMLChronicmyeloidleukemia慢性粒细胞白血病CML-CPChronicmyeloidleukemia-chronicphase慢性粒细胞白血病慢性期PhPhiladelphia费城染色体DMSOdimethylsulfox

4、ide二甲基亚砜CCK-8CellCountingKit-8细胞活性检测试剂盒FCMflowcytomctry流式细胞仪FBSFoetalBovineSerum胎牛血清PIPropidiumIodidcdiameter碘化丙啶STI571Imatinib伊马替尼CHRcompletehematologicalremission完全血液学缓解PBSPhosphatebuffersolution磷酸盐缓冲液FITCfluoresceinisothiocyanate异硫氰酸荧光素MCRmajorcytoge

5、neticremission主要细胞遗传学缓解ANOVAone-wayanalysisofvariance单因素方差分析minminute分钟ugmicrogram微克刺梨联合金荞麦提取物对人慢性粒细胞白血病K562细胞的影响专业内科学研究生王圆指导老师葛繁梅教授摘要目的研究刺梨提取物CL、金荞麦提取物FR单药及两药联合对人慢性粒细胞白血病细胞株K562增殖以及凋亡的作用，并初步探讨其可能的产生作用的机理。方法1.采用CCK-8法检测不同浓度CL、FR单药及两药联合作用于K562细胞24h、48h、7

6、2h后的细胞生长状况。2.荧光显微镜下Hoechst33342染色观察CL、FR单药及两药联合作用于K562细胞48h后细胞凋亡形态变化。3.PI染色流式细胞术检测CL、FR单药及两药联合作用于K562细胞48h后对细胞周期的影响。4.使用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测CL、FR单药及两药联合作用于K562细胞48h后细胞凋亡率变化。5.采用免疫细胞化学法检测CL、FR单药及两药联合作用于K562细胞后c-myc蛋白表达阳性率变化。结果1.不同浓度CL、FR单药及两药联合作用于K5

7、62细胞不同时间后，都使细胞的增殖出现了抑制。在一定范围内，上调药物浓度和增加药物作用时间，均使得细胞抑制率上升，表现出时间及剂量依赖效应。二者联合应用抑制率强于单药及对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。2.荧光显微镜下观察到CL、FR单药及两药联合作用于K562细胞48h后，与对照组比较，均出现细胞核固缩及核碎裂现象，联合组这种改变明显强于单药组，差异显著。3.CL、FR单药及两药联合作用于K562细胞48h后，与对照组比较，均出现G0/G1期阻滞，联合作用组的G0/G1期细胞数目增加较单药组

8、更加突出，结果有统计学意义（P＜0.05）。4.CL、FR单药及两药联合作用于K562细胞48h后，与对照组比较，均可以诱导细胞凋亡，且两药联合后的凋亡率较单药组增加明显，有统计学意义（P＜0.05）。5.CL、FR单药及两药联合作用于K562细胞均可下调c-myc蛋白表达，联合组较单药组作用更显著。结论CL、FR单药及两药联合对K562细胞均可起到抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡的作用，其增殖抑制作用的产生呈现出时间-剂量依赖性；CL、FR单药及两药联合均可