兽药多残留悬浮芯片技术检测研究

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4、级公开硕士学位论文MASTERDISSERTATION兽药多残留悬浮芯片技术研究Studyonthemulti-residuedetectionofveterinarydrugsbysuspensionarraytechnology作者梁世正导师潘家荣研究员申请学位理学硕士培养单位中国计量学院学科专业生物化学与分子生物学研究方向食品科学二〇一五年六月致谢欢乐的时光总是短暂的，研究生三年，如白驹过隙，匆匆而过。三年的研究生涯，十分充实。首先，我要感谢潘家荣导师，他是我最应该感谢的。如果不是他在本科时循循善诱，我想也不会对研究充满兴趣，有这三年的生活。

5、潘老师以他博学多识，且书业有专攻，灵活独创的思维，折服了我和众多学子。每当实验困难重重，毫无头绪时，他总能帮助我抽丝剥茧，给我一种“柳暗花明又一村”。平时，潘老师能与我们把酒言欢，关心我们的生活。称得上亦师亦友。其次，我要感谢我的同门。诸葛洁婧师姐、潘文彬师兄、张弛、冯涛、傅丽丽等无论在生活与实验，都能愉快地玩耍在一起。特别是在实验间隙，和他们聊聊天，让重复不断的实验增添一份快乐。再次，我要感谢黄迅辰、苏东洋、骆晓波等天问328和天问318全体成员以及班级同学，是他们给我的实验之余多了许多有趣活动，爱上研究生生活。还有，我要感谢所有在实验、生活中帮

6、助我，给我带来快乐的人。最后，也是最重要的，我要感谢我的家人，是他们的鼓励和支持，才使得我顺利完成学业。此致敬礼！梁世正2015年03月兽药多残留悬浮芯片技术检测研究摘要：悬浮芯片技术是最近几十年兴起的多元分析方法，广泛应用于蛋白质和核酸检测。微球是悬浮芯片技术的重要载体。本文尝试先利用分散聚合方法合成单分散聚苯乙烯微球，再用沉降分离法分离获得目标微球，最后用后修饰法在微球表面修饰羧基，成功制得粒径约为5435nm，带羧基的单分散聚苯乙烯微球。这为以后研制悬浮芯片系统配套使用的荧光微球奠定扎实的基础。实验证明二抗上标记的PE荧光信号能被悬浮芯片系统

7、所识别，并成功地将兽药抗原偶联到微球上。之后优化了反应条件，偶联时七种兽药抗原的最佳加入量为：甲硝唑4μg，呋喃唑酮8μg，莱克多巴胺4μg，沙丁胺醇2μg，克伦特罗4μg，磺胺二甲嘧啶4μg，磺胺喹恶啉8μg；反应时，兽药抗体的最佳加入量为：莱克多巴胺5ng，沙丁胺醇10ng，克伦特罗20ng，磺胺喹恶啉10ng，磺胺二甲嘧啶20ng，甲硝唑200ng，呋喃唑酮100ng；羊抗兔PE标记二抗、羊抗鼠PE标记二抗的最佳稀释倍数分别为300、150；而最适的一抗孵育、二抗孵育时间分别为60min、45min。基于优化后的实验参数，根据间接竞争法，兽药

8、抗原偶联微球作为探针与靶分子共同竞争兽药抗体，再以PE标记二抗作为报告信号，建立了莱克多巴胺、克伦特罗、沙丁胺醇、磺胺二甲