悬浮芯片法与常规酶联免疫吸附法检测3种兽药残留的比较

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1、悬浮芯片法与常规酶联免疫吸附法检测3种兽药残留的比较作者：刘楠苏璞高志贤朱茂祥杨陟华潘秀颉晁福寰【摘要】建立氯霉素，克伦特罗和雌二醇3种兽药残留同时检测的悬浮芯片法。通过将3种兽药的BSA蛋白结合物偶联于悬浮芯片的固相载体——聚苯乙烯荧光微球上作为检测探针，采用间接竞争法，在液相反应体系中，3种小分子兽药抗原和微球上的兽药结合物共同竞争液相中各自特异性的生物素化单抗，再加入藻红蛋白标记的链霉亲和素，反应后检测获得荧光信号，绘制出3种兽药残留检测的标准曲线。同时进行3种兽药的常规酶联免疫吸附法标准曲线的测定。在检测技术、检出限、检测区间、特异性

2、、盲样测定和多元分析等方面对两种方法进行比较。除了特异性外的其它指标的比较中，悬浮芯片法均具有明显优势。两种方法的特异性检测具有良好的一致性。高通量悬浮芯片技术，具有操作简单、灵敏快速和成本低廉等优点，为多种兽药残留的快速检测提供了新方法。【关键词】悬浮芯片，酶联免疫吸附法，残留，微球，中位荧光强度值　　AbstractAnovelsuspensionarraytechnologywasestablishedforthedetectionofthreekindsofveterinarydrug12residues:chloramphenico

3、l,clenbuteroland17βestradiol.ThethreeconjugatesinwhichveterinarydrugscoupledwithBSAwereimmobilizedonthesolidcarrierofthesuspensionmicroarraypolystyrenefluorescentmicrospheres/beadsasdetectiveprobes.Indirectcompetitivetechnologywasemployed.Competitivereactionsbetweentheve

4、terinarydrugsintheaqueousphaseandtheveterinarydrugsBSAconjugatesonthebeadsforcouplingwiththeircomplimentaryspecificbiotinylatedmonoclonalantibodieswerecarriedout.Andthen,straptavidinphycoerythrinwasaddedforcouplingandthefluorescentsignalswerecaptured.Afterwardsthedetectiv

5、estandardcurveswereplotted.TheregularELISAstandardcurvesofthethreeveterinarydrugswerealsoplotted.Comparisonbetweensuspensionarrayandregularenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)wasintherespectsofthedetectivetechnology,thedetectionlimits,thedetectiveranges,thesamplesdetectio

6、nandthemultianalysis.Suspensionarraytechnologyisdistinctadvantageousexceptforspecificity.Therewaswellconsistentperformancebetweenthetwomethods.Thehighthroughputsuspensionarrayprovidesanovelmethodformultianalysisofveterinarydrugswithsimpleoperation,sensitive,rapidandlowco

7、sting.12　　KeywordsSuspensionmicroarray,Enzymelinkedimmunosorbentassay,residue,microspheresbeads,medianfluorescentintensity　　1引言近年来，食品安全已成为社会共同关注的公共卫生问题，而兽药残留成为食品安全监管的重要问题。兽药残留如克伦特罗(clenbuterol,CL)、氯霉素(chloramphenicol,CAP)和雌二醇(17βestradiol,E2)的滥用和食用可导致多种健康损害[1～6]。加强兽药残留检测

8、分析是监管和控制兽药残留的重要手段。因此，简单、快速和灵敏的微痕量检测技术的研究和创新尤为重要。目前，酶联免疫吸附测定法(enzymelinkedimmunoso