体外转染cyclina2基因对原代大鼠心肌细胞增殖的影响

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1、单位代码：１０４７２学术学位：口专业学位：Ｕ学号：１２（３５００４Ｑ２８中图分类号：密级：公开ｋ斬Ｉ咨霞硕±学位论文体外转染ＣｙｃｌｉｎＡ２基因对原代大鼠心肌细胞增殖的影响ＩｎｆｌｕｅｎｃｅｏｎｔｈｅＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＰｒｉｍａｒｙＣａｒｄｉｏｍｏｃｔｅｓｂｙｙｙＴｒａｎｓｊｆｅｃｔｉｏｎＣｙｃｌｉｎＡ２ＧｅｎｅｉｎＶｉｔｒｏ作者姓名：卢杏导师姓名：徐振平教授贾银明教授学科口类：临床医学专业名称：内科学培养院系；安阳市中医院—完成时间：二〇五年

2、王月ＩｎｆｌｕｅｎｃｅｏｎｔｈｅＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＰｒｉｍａｒｙＣａｒｄｉｏｍｏｃｔｅｓｙｙｂｙＴｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎＣｙｃｌｉｎＡ２ＧｅｎｅｉｎＶｉｔｒｏＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｔｅｄｆｏｒｔｈｅＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒＣａｎｄｉｄａｔｅ：ＬｕＸｉｎｇＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＸｕＺｈｅｎｐｉｎｇＰｒｏｆ．ＪｉａＹｉｎｍｉｎｇＳｃｈｏｏｌｏｆＡｎｙａｎｇＨｏｓｉｔａｌｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃ

3、ａｌｐＸｉｎｘｉａｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙ新乡医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加Ｗ标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式标明。。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担作者签名：日期：２０１５年３月２５日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家

4、有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权新乡医学院可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进斤检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。＂＂本学位论文属于（请在１＾下相应方框内打Ｖ）：１．保密□，在年解密后适用本授权书。＿２．不保密＆９＾＾作者签名：＾日期：２０１５年５月１５日导师签名：日期；２０１５年５月１５日目录摘要１Ａｂｓｔｒａｃｔ４前胃７材料与方法９结果１９２６小结３４参考ｉ献３０ｌｉ

5、综述：ＣｙｃｎＡ２基因与也肌再生的关系及意义３５附录５２攻读硕±学位期间发表文章情况５３５４致谢５５个入简历新乡医学院硕±学位论文体外转染ＣｙｃｌｉｎＡ２基因对原代大鼠心肌细胞增殖的影响摘要背景临床上对也血管恶性事件的救治主要依赖于药物控制和手术干预，但是从治疗效果和长远收益来看，也肌梗死的死亡率只是得到了暂时的控制，而也力衰竭的死亡风险却在无形加剧，近年来已广泛开展，。Ｗ干细胞替代治疗为主的实验研究但仍受细胞来源，、移植风险等客观因素的影响，同时又受伦理道德等因素的约束

6、在临床上一旦受到损伤尚未大规模应用，，，导致大量。众所周知成熟也肌细胞増殖能力很低也肌细胞坏死，也脏功能受损甚至衰竭，若能诱导成熟的也肌细胞进行分裂增殖，也脏再化的难题就有望得到彻底攻克。然而有关也肌细胞增殖再生方面尚有诸多问题。ＣＡ２＾ｙｃｌｉｎ基因作为细施周期的个主控因子控制着细胞周期各个时相的及时转换和、循环往复，对细胞周期正确发挥其调控作用至关重要，对于解决屯肌再生问题具有很高的研究价值。目的探讨体外转染细胞周期素Ａ２（ＣｙｃｌｉｎＡ２）基因对原代大鼠也肌细胞增殖的影响，为也脏再生提供细

7、胞学依据。方法１．也肌细胞原代培养采用酶联合消化法结合差速贴壁法，分离、培养、纯化大鼠乳鼠原代必肌细胞，在活细胞工作站下实时动态腔测细胞的生长状态，摄片记录原代培养过程中也肌细胞的形态变化。２．基因转染也肌细胞原代培养第３天，分别转染带有预先包装好的携带目的基因ＣｙｃｌｉｎＡ２的重组腺病毒和仅含有绿色巧光蛋白的空病毒。３１．实验分组）重组腺病毒ＣｃｌｉｎＡ２基因转染组：转染带有强化绿色巧光蛋白（ｙ＊ＦｃＡ２－ｅｎＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔＰｒｏｔｅｉｎ畑ｌｉｎ因的重组腺病毒（ＡｄＣｃｌｉｎ（Ｇｒ

8、ｅ，）和Ｃｙ基ｙ１新乡医学院硕±学位论文－ＧＦＰ）Ａ２（２）空病毒转染组：转染不含目的基因仅有ＧＦＰ的重组腺病毒；－ＮｄｋＧＦＰ组（Ａｄ）；未做转染处理，仅加入等量的培养基。；（３）阴性对照