以水泡性口炎病毒vsv为载体的结核疫苗vsv-846的免疫作用及机制探讨

《以水泡性口炎病毒vsv为载体的结核疫苗vsv-846的免疫作用及机制探讨》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、■乂爭如－■ＳＯＯＣＨＯＷＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ硕：ｔ学位论文ＩｊＨ＂＂ＨＩＢＰＩ＾１论文题目Ｖ为载体的结核疫苗ｉｇ水泡性口炎病毒ｖｓ＾ＶＳＶ－８４６的免疫作用及机制探ｉ寸研究生姓名张明旨教誠＾熊思东＾专业名称９Ｈ｜＾研究方向感染与免疫过…论文提交日期２０１５年Ｕ月１＇１苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文

2、不含其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中！Ｍ明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名：日期：苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即。本学位论文电子文档的内容和纸：学位论文著作权归属苏州大学一质论文的内容相致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中也、、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版化）中国学术

3、期刊（光盘版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子，、文挡，允许论文被查可Ｗ采用影印印或其他制手段阅和借阅缩复学位论文，可将论文全部或容入有关数保存和汇编学位的部分内编进行检。据库索涉密论文口密后适用规。本学位论文年月解本定属＿＿＿声＾论文０非涉密，／．论文：：艺签名日期／１作者。化导：令期：文，〉、签名日．—师碑＂以水泡性口炎病毒VSV为载体的结核疫苗VSV-846的免疫作用及机制探讨中文摘要中文摘要目前，结核病依然是世界范围内的严重疾病。我国的结核病疫情告急，根据2010年

4、第五次全国结核病流行病学的调查结果显示，我国年发病人数约为130万，约占全球发病的14.3%。结核病疫情之所以未能获得有效的控制，其主要原因是预防性结核病疫苗的开发缓慢以及进展不足。世界上目前唯一可用的结核疫苗BCG，因其只能保护幼儿及婴儿，不能在成人身上起到良好的保护效果，急需对BCG进行改进或研制新的疫苗。考虑到结核疫苗的现状，新型疫苗应该具有能够在体内建立长效免疫应答的特点。水泡性口炎病毒（VesicularStomatitisVirus，VSV）因其本身具备的大量优点且在普通人群内存在抗VSV抗体少等特点，使其成为一个

5、理想的病毒疫苗载体。本文通过分子生物学的方法将含有结核杆菌三抗原融合基因p846及单个抗原Rv3615c，Mtb10.4，Rv2660c克隆至VSV-XN2载体，通过VSV病毒包装系统，将其包装在VSV病毒中，同时我们也构建了三个单个抗原及融合抗原TFP846的原核表达载体，并体外纯化了相应蛋白。将成功构建的重组VSV病毒融合抗原疫苗和单抗原疫苗以滴鼻的方式对小鼠进行免疫，以BCG组作为对照组。整个检测过程在攻毒后持续24周，检测相应的细胞免疫应答，评估其在抗结核感染中的作用，并探讨该保护作用的机制机理。统计结果表明重组病毒V

6、SV-846疫苗诱生的细胞和体液免疫应答、及保护作用和传统疫相对单个抗原疫苗有着极其显著的差异，在感染阶段的后期（24周）与BCG免疫组相比也具有差异性，并且可以检测到记忆性T细胞的产生。通过Brdu，LDH，细胞染色等一系列实验表明，三抗原融合疫苗，彼此相互促进，使得整个疫苗较单独抗原所制备的疫苗具有明显的优势，能够激发更强劲的T细胞应答。并且我们也探究了VSV-846是否能够作为一个BCG的booster来促进其保护效果，实验结果显示，在攻毒后的第24周，经过VSV-846加强免疫组的细菌载量明显低于BCG组（CFU减少了

7、1.10log10，P<0.01），说明此方案是可行的。综上，我们构建的三抗原融合的病毒载体结核疫苗VSV-846免疫小鼠能引起强烈的体液和细胞免疫应答，且以细胞免疫应答为主，可促使效应型记忆性T细胞的产I中文摘要以水泡性口炎病毒VSV为载体的结核疫苗VSV-846的免疫作用及机制探讨生，能长期有效的抗BCG的感染，且保护效果好于单个抗原疫苗，有望成为一种能有效控制结核病复发的新型疫苗。关键词：重组水泡性口炎病毒；BCG；记忆性T细胞作者：张明指导教师：熊思东教授II以水泡性口炎病毒VSV为载体的结核疫苗VSV-846的免疫作

8、用及机制探讨英文摘要AVesicularStomatitisVirus-BasedTBVaccineVectorVSV-846anditsImmuneEffectsandMechanismAbstractTuberculosisisstillaserioushealthpro