从pten-pi_3k-akt信号通路探讨补肾疏肝方含药血清抑制人肺腺癌a549细胞增殖和转移的机制

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1、学校代码10459学号或申请号201212443442密级公开硕士学位论文从PTEN-PI3K-AKT信号通路探讨补肾疏肝方含药血清抑制人肺腺癌A549细胞增殖和转移的机制作者姓名：尚亚丽导师姓名：王淑玲教授学科门类：医学专业名称：中西医结合临床培养院系：郑州大学第一附属医院完成时间：2015年5月Athesis(dissertation)submittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterMechanismofDrug-containedSerumofBuShenShuGanFormu

2、laInhibittingA549HumanLungAdenocarcinomaCellProliferationandMetastasisfromPTEN-PI3K-AKTSignalingPathwayByYaliShangSupervisor:Prof.ShulingWangClinicalDisciplineofChineseandWesternIntegrativeMedicineTheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityMay2015学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交

3、的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，木论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：I^H期：年夕月^H学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库

4、进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：/仓iMlH期：年y月z/H摘要从PTEN-PI3K-AKT信号通路探讨补肾疏肝方含药血清抑制人肺腺癌A549细胞增殖和转移的机制研究生尚亚丽导师王淑玲郑州大学第一附属医院中西医结合科中国郑州450052中文摘要研究背景及目的：大城市大气严重污染和人口老龄化使我国肺癌发病风险逐渐上升；目前肺癌发病率和死亡率据国内恶性肿瘤首位。

5、80%以上肺癌患者发现时已属于晚期肺癌，绝大多数已经失去手术的机会。肺癌组织类型主要包括小细胞肺癌（SCLC）和非小细胞肺癌（NSCLC）。NSCLC主要包括肺腺癌和鳞癌。肺腺癌是最常见的组织亚型，占据NSCLC50%以上。随着科学研究成果逐渐用于临床，肺癌的组织分型逐渐过渡到分子分型，且肺癌的治疗越来越个体化、毒副作用越来越小、生存期越来越长。目前肺癌常用的治疗手段：手术、放化疗、介入、生物治疗（包括靶向治疗、过继细胞免疫治疗、细胞因子治疗等）等。不可忽略的是中医药在肺癌辅助治疗发挥重要作用：抗肿瘤、增敏放化疗和抑制耐药、提高患者生

6、存质量、延长生存期等。中西医结合治疗肺癌获得更好效果。以扶正为主的中药是中医药治疗肺癌等恶性肿瘤主要用药。研究发现，从肾论治肺癌，取得很好效果：不仅能增强机体免疫力，抑制肺癌的增殖、转移及复发，还能提高生活质量，延长生存期。既往研究，补肾疏肝方有抗肺癌、使化疗增效、抑制转移、提高免疫力的作用。本实验通过MTT实验观察补肾疏肝方含药血清对肺癌A549细胞增殖；三维培养观察其对血管生成拟态的影响；RT-PCR实验观察其对PTEN-PI3K-AKT信号通路上的AKT-1、CyclinD1、NF-κBmRNA表达的影响；westernblot

7、实验观察其对PTEN-PI3K-AKT信号通路上的PTEN、p-PI3K、p-AKT蛋白的表达影响。进一步研究补肾疏肝方抑制肺腺癌细胞增殖和I摘要转移的作用机制。为临床合理应用补肾疏肝方提供理论依据和实验依据。方法：雄性SD大鼠120只随机分为6组，平均每组分配20只，并检测到每组体重的方差齐，即每组体重无差异，平均约250g。分别将各组命名为生理盐水组（对照组简称S组）：2mL生理盐水d1-d5每天两次灌胃；顺铂组（P组）：-1顺铂4mL8mg·kg于d1、d3、d5每天腹腔注射一次，低剂量补肾疏肝方组（L-1组）：2mL补肾疏肝方

8、15g·kg的剂量于d1至d5每天两次药液灌胃；高剂量-1补肾疏肝方组（H组）：2mL补肾疏肝方30g·kg的剂量于d1至d5每天两次药-1液灌胃；低剂量联合顺铂组（C1组）：2mL补肾疏肝方15g·kg的剂量于d1至-