补肾疏肝方对有肺腺癌a549细胞及小鼠lewis肺癌抑制作用的实验研究

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1、AdissertationsubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterExperimentResearchofInhibitingEffectofBuShenShuGanFormulaonLungAdenocarcinomaA549CellsandLewisLungCMioancerice乙ByZhaosenGuSupervisor：Prof．ShulingWangCombinedTraditionalChineseandWesternMedicineTheFirstAffi

2、liatedHospitalofZhengzhouUniversityMay2012原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：吉蜘瓤日期：力f2年6月f日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或

3、向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：苗寸昏象日期：知IL年6月／日摘要补肾疏肝方对人肺腺癌A549细胞及小鼠Lewis肺癌抑制作用的实验研究硕士研究生：古兆森导师：王淑玲教授郑州大学第一附属医院中西医结合科河南郑州450052摘要背景

4、与目的：观察补肾疏肝方含药血清对人肺腺癌A549细胞生长的影响及补肾疏肝方对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫及内分泌的影响并研究其中可能存在的机制。方法：补肾疏肝方含药血清对人肺腺癌A549细胞生长的影响实验。选取健康的SD大鼠30只，随机分为五组：模型组、DDP组、补肾疏肝方低剂量组、补肾疏肝方中剂量组、补肾疏肝方高剂量组，每组6只。模型组给予生理盐水4ml／天；DDP组给予0．5mg／mlDOP液2ml，分别于第1、3、5天腹腔注射；补肾疏肝方低剂量组给予中药4ml／天灌胃(1．759／ml共计含生药79)；补肾疏肝方低剂量组给予中

5、药4ml／天灌胃(3．59／ml共计含生药149)；补肾疏肝方低剂量组给予中药4ml／天灌胃(5．259／ml共计含生药219)。共干预5天。第5天干预2小时后腹主动脉取血，制备大鼠含药血清，-20℃冰箱保存。临用时配制为含血清10％的培养液培养细胞，MTT法测0D值，观察补肾疏肝方含药血清对细胞生长的抑制作用。补肾疏肝方对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫及内分泌的影响实验。植瘤5天后，于腋下可触及约5mm*5mm肿块。选取荷瘤成功的C57BL／6小鼠40只，随机分为四组：模型组、DDP(cisplatin)组、补肾疏肝方组、DDP+中

6、药组。每组lO只。模型组给予0．9％NaCl灌胃0．4ml／天，同时于第1、3、5天腹腔注射0．9％NaClO．5ml。摘要DDP组小鼠分别在实验第1、3、5天给予腹腔注射0．5mlDDP(0．2mg／m1)溶液，并给予0．9％NaCl灌胃0．4ml／天。补肾疏肝方组给予中药灌胃0．4ml／天(1．759／ml共计含生药0．79)，同时于第l、3、5天腹腔注射0．9％NaClO．5ml。DDP+中药组给予每日中药灌胃，同时分别于第1、3、5天腹腔注射DDPO．5ml。共干预14天。每日记录小鼠精神状态、活动状况、毛发饮食及大小便情

7、况，每天称取小鼠体重，测肿瘤体积。于第15天摘眼球取血，剥取肿瘤称重，计算抑瘤率、肺转移抑制率等。采取酶联免疫吸附(ELISA)的方法检测血清IL_2、IL-10、E2、T含量。结果：l、体外实验中，与模型组相比，中药低剂量组48h、72h，中剂量组、高剂量组、顺铂组均可以抑制肺腺癌A549细胞生长，差异明显(p<0．01)，并呈时间．-剂量依赖性。高剂量组与顺铂组差异不明显(p>0．05)。2、体内实验中，与模型组相比，各用药组均能抑制肿瘤生长，差异明显(p<0．01)。与中药组相比较，中西医结合组平均瘤重显著降低，有统计学意义

8、(p<0．05)。3、与模型组相比，其余各组均能显著抑制肿瘤的自发性肺转移(p<0．05或P<0．01)。4、实验结束后，与模型组相比，DDP组小鼠体重均明显减轻，差异显著(p