人食管鳞癌癌前病变基因及相关蛋白表达变化的研究

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1、，也京碱如酵ｆ從中５刮養巧＞硕±研究生学位论文北京协和医学院研究生院学校代码：１００２３学号：Ｓ２０１２００３００６硕±学位论文人食管鱗癌癌前病变基因及相关蛋白表达变化的研巧Ｓｔｕｄｙ０田ｇｅｎｅａｎｄｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｐｒｅｃａｎｃｅｒｓｏｆｈｕｍａｎｅｓｏｐｈａｇｅａｌｓｑｕ江ｍｏｕｓｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ所院：肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室姓名；韩旭指导教师：童形研究员

2、导师小组：童形研究员詹启敏院壬薛丽燕副主任医师学科专业；细胞生物学研究方向：分子肿瘤学完成日期二零一五年四月；北京协和医学院中国医学科学院硕±毕业论文目录目录ｅ录１臟引３４表索引中英文缩略巧５中文摘要６Ａｂｓｔｒａｃｔ８一第部分１０ｉｒＷ１１材料与方法１４１．实验材料１４１．１组织样本１４１２１４．菌种、质粒及细胞株１．３主要试剂１５１．４主要仪器设备１７１．５实时定量ＰＣＲ引

3、物序列１９１．６重要试剂的配制１９２．妨＆２２２．１２２细胞处理２．２总ＲＮＡ和总蛋白的提取２３２．３ＲＮＡ和蛋白浓度测定２５２．４利用基因忘片检测ｍＲＮＡ表达谱如２．５ＰＣＲ３１２．６ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ３２２３３．７感受态细胞的制备２．８＾ｉｔ３３２．９质粒提取及鉴定３４２．１０质粒瞬时转染３６２１Ｔ．１ｒａｎｓｗｅｌｌ实验３６２．１２免疫组织化学３７２．３８１３统计学分

4、析魏结果３９１．ＥＳＣＣ姐织中差异性表达的基因３９１．１利用表达谱忍片检测ＥＳＣＣ组织样本中总ｍＲＮＡ表达谱３９１．２ＥＳＣＣ组４织ｍＲＮＡ表达的总体特征１３ＥＳＣ４１．Ｃ组织中差异性表这基因的功能分析１２．重度不典型増生组织中差异性表达的基因４２２１４４．重度不典型增生组织ｍＲＮＡ表达的总体特征２．２在正常姐织、切缘沮织及病变组织中逐渐高表达的基因４５２３５．在正常组织、切缘组织及病变组织中逐渐降低表达的基因４３．在ＥＳＣＣ及重度不典型

5、增生组织中均出现差异性表达的基因４６１北京协和医学院中国医学科学院硕丄－毕业论文目录４．差异性表达的候选基因４７４．１ｍＲＮＡ４７候选基因在临床组织中水平的表达情况４．２候选基因在各细胞株中的表达情况４９５Ａｕ－５．ｒｏｒａＡ１５．１候选基因在ＥＳＣＣ及其癌前病变姐织中的表达特征５２５．．．．．５５．２过表达基因，人食管上皮永生化细胞体外增殖和迁移能力均上升．．讨论５７展望６１小结６２第二部分６３前言６４材料与方法６６

6、１．实验材料６６１．１组织样本６６１２．菌种、质粒及细胞株６６１．３主要试剂６６１．４主要仪器设备６６１．５引物的合成与设计６７１．６重要试剂的配制６７２．研巧方法６７２１６７．对细胞的处理２．２细胞总ＲＮＡ和总蛋白的提取６７２．３ＲＮＡ和蛋白的浓度测定６８２．４ＰＣ民６８２ｔｌｉ．５ＷｅｓｅｒｎＢｏｔｔｎｇ６８２．６Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ实验６８２．７免疫组织化学６９２．８数据的获取及分析７

7、０魏结果７１１．］＼形基因在ＥＳＣＣ及其癌前病变组织中的表达特征７１１．１Ｎｉｐ的表达水平与食管上皮鱗状细胞的病变严重程度呈正相关７１１２Ｎ７２．ｉｐ的表达水平与其他主要临床特征无明显相关性２．Ａ咕基因和基因的表达水平呈线性正相关７３３．Ａ皆基因ｍＲＮＡ在临床組织中的表达情况７４４．过表达ｉＷ／７基因，人食管上皮永生化细胞迁移能力显著上升、体外增殖能力也存＆上升现象７５材论７６小结７９＃＃文献８０文＃８５親９１硕±

8、在读期间发表与待发表论文９２基金资助９３独创性声明９４２北京协和医学院中国医学科学院硕±毕业论文图索引图索引图１；ＥＳＣＣ姐织及其癌旁正常组织总ｍＲＮＡ表达谱４０２ｍ．４１图：ＥＳＣＣ沮织及其癌旁正常组织在总ＲＮＡ表达谱水平的差异４４３、图：重度不典型増生组织切缘组织及远端正常组织总ｍＲＮＡ表达谱４８图４：候选基因在临床样本中ｍＲＮＡ水平的表达水平５４９图：候选基因在各细胞株