人参中齐墩果酸型人参皂苷ro的制备及大鼠体内代谢研究

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1、分类号：R932单位代码：10193密级：公开学号：2012143硕士学位论文人参中齐墩果酸型人参皂苷Ro的制备及大鼠体内代谢研究PreparationandmetabolisminratsofginsenosidesRoofoleanolicacidtypeinginseng作者姓名：王佳学位类别：医学硕士专业名称：中药学研究方向：中药新药研究与开发指导教师：王英平研究员所在学院：中药材学院2015年5月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过

2、的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人

3、（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日指导教师签名：签字日期：年月日摘要1本实验采用大孔吸附树脂-硅胶层析柱-反相C18中压柱及半制备液相对人参中齐墩果酸型人参皂苷Ro进行分离纯化。此法操作简单，方便快捷，成本低且相对稳定，适合对人参中人参皂苷Ro进行分离提纯，可以短时间内快速大量制备纯品单体人参皂苷Ro，本方法研究为人参

4、皂苷Ro的后续研究提供了大量纯品单体。2人参皂苷Ro在人参中具有相对较高的含量，其具有多种药理活性，目前已被广泛应用。但是有关其代谢研究较少。因此，本实验采用LC-MS/MS法对尿液和粪便中人参皂苷Ro的代谢产物进行鉴定分析。并对其中6种含量较高的代谢产物进行定量分析。除人参皂苷Ro外，14种代谢产物被检测并鉴定。其中代谢产物zingibrosideR1，chikusetsusaponinIva，silphiosideF，glucosyloleanolate和oleanolicacid为水解反应产生，而vitalbosideA，acutosideA和asteryunnanosi

5、deF则通过齐墩果酸的结合反应获得。glucosyloleanonate和oleanonicacid通过氧化反应获得。11-oxoerythrodiol，15-hydroxy-3-oxo-olean-12-en-28-oicacid，15-hydroxy-olean-12-en-28-oicacid和morolicacid则通过多重反应产生。72h内人参皂苷Ro的回收率为60%。苷元上糖苷的水解为其主要的代谢途径。根据定量分析结果显示，粪便中代谢产物zingibrosideR1，glucosyloleanolate和ginsenosideRo的形式排出体外分别占总量约10%（m

6、ol/mol）。而齐墩果酸的排泄量占总量的25.9%。其它代谢产物的排泄量相对较低。尿液中代谢产物的排泄量约占总排泄量的0.12%。3通过对比分析人参（PanaxginsengC.A.Mey.）和西洋参（PanaxquinquefoliumL.）根、茎、叶中齐墩果酸型皂苷种类及人参皂苷Ro含量的差异，观察齐墩果酸型皂苷的分布规律。采用HPLC-MS/MS对齐墩果酸型皂苷进行鉴定及Ro含量测定；色谱柱：AgilentTC-C18（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：2.5mmol/L乙酸铵（w/v）和0.05‰氨水（v/v）水溶液（A）-乙腈（C）梯度洗脱；流速：1ml/m

7、in；检测波长：203nm。共鉴定了6种齐墩果酸型皂苷，分别为人参皂苷Ro（1）、竹节参皂苷Iva（2）、姜状三七皂苷R1（3）、stipulenaosideR2（4）、armatoside（5）和elatosideK（6）。其中人参根、茎和叶中均含有化合物1、2和3；西洋参茎中含有化合物1、3和4，叶中含有化合物1和4，根中含有上述6种化合物。对含量较高的人参皂苷Ro进行分析发现，根部为Ro的主要积累部位，且西洋参根部含量（0.576%）高于人参根部（0.214%）；两者不同部位Ro含量差