三聚氰胺与三聚氰酸联用对鸡肾脏损伤的研究

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1、分类号UDC密级编号专业硕士学位论文三聚氰胺与三聚氰酸联用对鸡肾脏损伤的研究Studyonkidneyinjuryofkidneybycombinedmelamineandcyanuricacid学位申请人：张远飞指导教师：龙塔教授刘志军讲师合作教师：王明旻研究员专业领域：兽医学位类别：兽医硕士2015年06月独创性声明本人声明，所呈交的论文是我个人在导师指导下完成的研究工作及取得的研究成果。据我所知，文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河南科技大学或其它教育机构的其他学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做

2、的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：日期：摘要摘要三聚氰胺与三聚氰酸是两种化工原料，均不能添加到饲料中。但近年来由于工业污染、饲料兽药原料生产、环境富集等因素，三聚氰胺与三聚氰酸常被发现存在于饲料中，给动物带来严重的安全隐患。为进一步明确三聚氰胺与三聚氰酸联用对鸡肾脏的损伤提供试验依据，本试验将144只7日龄蛋雏鸡随机均分成三组，对照组饲喂基础饲料，低剂量组饲喂[（30mg三聚氰胺+10mg三聚氰酸）/kg]的饲料、高剂量组饲喂[（50mg三聚氰胺+16.7mg三聚氰酸）/kg]的饲料。在试验开始后六周内，每周颈部脱臼处死对照组、实验组鸡群（8只/组/

3、次），取出肾脏，通过亚硝酸盐法测定T-SOD活性、硫代巴比妥酸反应法测定MDA含量、常规石蜡切片HE染色方法、细胞凋亡染液Hoechst33258切片染色方法、荧光分光光度计分析法定量检测Caspase-3活性、免疫组化法检测GRP78蛋白的表达来研究三聚氰胺与三聚氰酸联用对鸡肾脏的损伤。研究结果如下：1.所有实验组鸡群肾脏T-SOD活性均值低于对照组。其中试验第1周至第5周，实验组与对照组相比差异不显著（P>0.05），而在试验第6周，高剂量实验组鸡群肾脏T-SOD活性均值显著低于于对照组（P<0.05）；所有实验组MDA含量均高于对照组，其中第3周至第6周实验组（第6周低剂

4、量组除外）MDA含量均值均显著高于对照组（P＜0.01）。结果表明二者联用能诱导鸡肾脏氧化损伤，与时间和剂量有一定关系。2.低剂量组：第1周与第3周肾小管上皮细胞出现轻微病变；第6周可见肾小管上皮细胞肿胀、变性，一些细胞细胞核浓缩。高剂量组：第1周病变较轻微，第3周肾小管上皮细胞肿胀、坏死。第6周肾小管上皮细胞细胞胞核崩解、淡染、消失；细胞核浓缩；上皮细胞与基底膜分离，细胞脱落到管腔内；肾间质毛细血管扩张并伴有轻度出血。结果表明二者联用能导致鸡肾脏组织病理损伤，主要集中在对肾小管的损伤，可引起细胞的变性、坏死和细胞凋亡。3.试验第6周实验组凋亡细胞数与对照组相比显著增多；实验组

5、鸡群肾脏组织内Caspase-3活性显著高于对照组（P<0.05）。结果表明二者联用能诱导鸡肾脏组织内Caspase-3活性增高，进而引起凋亡细胞的数目增多。4.试验第6周三聚氰胺与三聚氰酸联用的实验组GRP78蛋白表达量与对照相比显著增高（P＜0.01）。结果表明二者联用能诱导鸡肾脏细胞GRP78蛋白的表达量显著增加，揭示存在内质网应激反应。摘要关键词：三聚氰胺；三聚氰酸；鸡；T-SOD；MDA；病理组织；细胞凋亡；GRP78论文类型：基础研究选题来源：学校自选项目IIABSTRACTABSTRACTMelamineandcyanuricacidaretwokindsofch

6、emicalrawmaterials,cannotbeaddedtothefeed.Butinrecentyears,duetoindustrialpollution,theproductionoffeed,veterinarymedicinerawmaterialsandenvironmentalenrichmentfactors,melamineandcyanuricacidareoftenfoundinthefeed,bringaserioussecurityrisktoanimal.Inordertofurtherclarifythemelaminecombinedwi

7、thcyanuricacidtothechickenkidneyinjuryandprovideexperimentalbasis,the144,7dayoldchickenswererandomlydividedintothreegroups,thecontrolgroupwasfedbasaldiet,lowdosegroupwerefedwith[(30mgmelamine+10mgcyanuricacid)/kg]feed,highdosegroupwerefedwith[50mgm