高通量ssr标记技术在小麦品种检测中的应用研究

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1、AGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI全日制硕士专业学位（毕业）论文高通量SSR标记技术在小麦品种检测中的应用研究学位申请人：李宏博指导教师：陈景堂教授赵昌平研究员学位名称：农业推广硕士研究领域：作物授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一五年五月三十日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得^或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明病的说明并表示谢意。学位论文作者

2、签名：签字日期：城年〈月3日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解河北农业大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权河北农业可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名:靱4导师签名:签字日期：年<月J签字曰期：年<月j曰0学位论文作者毕业后去向：工作单位：电话:itilU也址：邮编:分类号：S512.1单位代码：10086密级：公开学号：20139100604高通量SSR标记技术在小麦品种检

3、测中的应用研究ApplicatedResearchoftheHigh-throughputSSRMarkersinDetectionofWheatVarieties学位申请人：李宏博指导教师：陈景堂教授赵昌平研究员学位名称：农业推广硕士研究领域：作物授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一五年五月三十日摘要本研究通过对PCR热循环条件、特征峰值识别、等位变异赋值以及多重电泳体系构建等进行探索，以检测结果准确、稳定、快速为原则，建立基于SSR荧光标记的小麦品种高通量检测技术，并应用于2014年区域试验品种的特异性、一致性、稳定性和真实性鉴定，以及2009-2013年河北省区域试验品种的DNA指

4、纹图谱构建和遗传差异分析。研究结果如下：1、对PCR反应的热循环参数进行摸索，减少了PCR产物非特异性扩增。分析毛细管电泳峰形的特征，对特征峰值和非特征峰值进行识别，确保读取数据的一致性和准确性。利用参照样品，将42对标记各个等位变异的参照品种进行赋值，同时确定了每对SSR荧光标记的具体峰值片段范围，为多重电泳构建立奠定基础。2、将不同荧光标记或峰值片段范围不同的相同荧光标记进行分组，根据品种鉴定需要，构建6-8重电泳组合，同时对不同荧光的PCR产物的混合比例及电泳体系体系进行优化。结果表明，毛细管电泳方法的检测效率、准确性、灵敏度均高于垂直板凝胶电泳方法，并将两种电泳方法的检测数据进行有

5、效转换和分析，确保前期小麦DNA指纹数据库的持续应用。3、构建了179个参试品种的DNA指纹图谱，对不同组别品种进行遗传多样性分析表明，北部麦区遗传多样性最丰富，黄淮南片和河南省区域试验品种最低。其中16个品种一致性较差，4个品种不具备真实性。4、采用42个SSR标记构建2009-2013年70份河北省区域试验小麦品种的DNA指纹图谱，并进行遗传差异分析。结果表明，42个SSR引物在70份品种中共检测到303个等位变异，平均等位变异7.21个，平均PIC值0.69；平均基因多样性0.73，品种间的遗传相似系数变化范围为0.05~1.00，平均0.28；表明河北参试品种间存在较大的遗传差异。

6、聚类分析把70份小麦品种可划分为4大类、6个亚类，表明同一育种单位或地区的品种遗传背景相近。关键词：小麦；SSR荧光标记；高通量；DNA指纹图谱，品种检测；遗传多样性ApplicatedResearchoftheHigh-throughputSSRMarkersinDetectionofWheatVarietiesGraduate:HongboLiMajor:CropSupervisor:Prof:JingtangChenProf:ChangpingZhaoAbstractInthisstudy,wefocusontheexplorationwhichincludesthePCRtherm

7、alcyclingconditions,characteristicpeakrecognition,assignmentofallelicvariation,theconstructionofmultipleelectrophoresissystemandsoon.Weestablishedthehigh-throughputdetectiontechnologyofwheatvarietiesfollowingthep