基于ssr标记技术的越橘亲缘关系分析及品种鉴定

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1、硕士学位论文基于SSR标记技术的越橘亲缘关系分析及品种鉴定GeneticrelationshipanalysisandcultivaridentificationofblueberrybasedonSSRmarkers学号：21018016完成日期：星Q!垒生墨旦大连理工夫学DalianUniversityofTechnologylIRIIlllIlllIllUlltIIIIlY2590307大连理工大学学位论文独创性声明作者郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除文中已经注明引用内容和致谢的地方

2、外，本论文不包含其他个人或集体已经发表的研究成果，也不包含其他已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。若有不实之处，本人愿意承担相关法律责任。学位论文题目：基王苎墨旦叠运堇本数越插塞缍差丕金堑丞昌盘鉴定作者签名：一兰垒t三2红卜一日期：互2筚年—L月j1L日大连理工大学硕士学位论文摘要本文建立了适用于越橘(Vacciniumspp．)品种鉴定及亲缘关系分析的SSR-PCR技术体系，用SSR标记技术对22种越橘栽培品种进行了遗传差异及亲缘关系分析，建立了一套完善的越橘品种鉴定

3、体系，为越橘种质资源的评价、鉴定、管理及越橘新品种的培育奠定了基础。建立的SSR．PCR反应程序为：94℃预变性4min；94℃40s，55-64℃(根据引物而定)40s，72℃40s，35个循环；72。C延伸8min。优化的SSR-PCR反应体系为：20此体系，Taq酶1，5U，M92+2．Onmol／此，dNTP0．25nmol／IsL，上下游引物各0．25pmol／laL，DNA模板40rig。筛选出15对扩增条带清晰、多态性高、重复性好的引物。每对引物获得多态性条带3～13条，22个品种共获得115条带，其中113条为多态性条带，多态

4、性比率为98．26％。22个品种的遗传相似性系数居于0．486-4)．886之间，其中奴伊(Nui)和布鲁瑞卡(Bluereka)遗传相似性系数最大；泽西(Jersey)和美登(Blomidon)遗传相似性系数最小。使用NTSYSpc(2．10e)根据非加权组平均法(UPGMA)绘制了22个越橘品种的遗传关系聚类图。聚类结果显示，供试越橘品种被分为2个大类，美登(Blomidon)被单独聚为一类，其余的21个品种被聚为一类，此21个品种又聚为2个亚类，其中晚熟品种迪克西(Dixi)和埃利奥特(Elliot)聚在一起，另外19个中早熟品种聚在一

5、起。说明SSR聚类结果与越橘品种遗传关系及表型特征相符。可以用于指导越橘杂交育种的亲本选配。实验筛选出了可用于22个越橘品种鉴定的SSR核心引物NA961和NAl040，核心引物组合能够完全区分22个越橘品种。用核心引物制作了参照分子量标记，构建了22个越橘品种的指纹图谱，建立了一套完整的越橘品种鉴定体系。实践验证SSR标记用于蓝莓品种鉴别的方法可行、结果可靠。关键词：越橘；SSR；亲缘关系分析；指纹图谱；品种鉴定基于SSR标记技术的越橘亲缘关系分析及品种鉴定Geneticrelationshipanalysisandcultivariden

6、tificationofblueberrybasedonSSRmarkersAbstractInthisstudy，aSSR—PCRprotocolservingforblueberry(Vacciniumspp．)geneticrelationshipanalysisandcultivaridenfificationwasestablished．Geneticrelationshipof22blueberrycultivarsWasanalyzedusingSSR(SimpleSequenceRepeat)markers．Ablueberr

7、ycultivaridentificationprotocolwasestablished．T11iSapproachwouldbenefitforblueberrygermplasmevaluation,identificationandmanagementaswellasnovelvarietybreeding．nleestablishedSSR．PCRprotocolforblueberryWaSasfollows：initialdenaturationat94℃for4rain；(denaturationat94℃for40s，ann

8、ealingattheoptimumannealingtemperatureoftheprimerpairfor40s，elongationat72℃for40s)