骨髓间充质干细胞对防治失神经肌肉萎缩的实验研究

《骨髓间充质干细胞对防治失神经肌肉萎缩的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、单位代码；１０４７２学术学位囚专业学位０８学号：１２０４００２中图分类号：Ｒ６密级：公开斬Ｉ咨ｉ硕±学位论文骨髓间充质干细胞对防治失神经肌肉萎缩的实验研究ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｒｅｓｅａｒｃｈｏｎＢｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｆｏｒｔｈｅｒｅｖｅｎｔｉｏｎｏｆｄｅｎｅｒｖａ村ｏｎｍｕｓｃｌｅａｔｒｏｈｐｐｙ作者姓名：侯晓乐导师姓名：董玉珍教授学科口类：临床医学专业名称；外科学培养院系一临床学院；新乡医学院第—完成时间：二０五年Ｈ月Ｅｘｅ＊ｐｉｉｍｅｎｔａｌｒｅｓｅａｒｃｈｏ

2、ｎＢｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｍａｌｙｓｔｅｍｃｅｌｌｆｏｒｔｈｅｒｅｖｅｎ村ｏｎｏｆｄｅｎｅｒｖａ村ｏｎｍｕｓｃｌｅｐａｔｒｏｐｈｙＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｔｅｄｆｏｒｔｈｅＤｅｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｇＣａｎｄｉｄａｔｅ：ＨｏｕＸｉａｏｌｅＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＤｏｎＹｕｚｈｅｎｐｇＴｈｅＦｉｒｓｔＣｌｉｎｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅＸｉｎｘｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ新乡医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。

3、除了文中特别加Ｗ标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品，。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。？作者签名；喊弓曰期；年ｙ月少曰《化学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权新乡長学院可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。＂＂本学位论文属于（请在Ｗ下相应方框内打

4、Ｖ）；１□，在．保密年解密后适用本授权书。＿＿保密口。特的＾日作者签名：期；年ｒ月曰主－幼导师签名；曰期；ｖ〇年ｒ月曰目录摘要１（）Ａｂｓｔｒａｃｔ（３）前胃…巧）１材料与方法（６）２结果（１４）３讨论（１６）４结论（２１）附图（２２）参考文献（２８）综述：组织工程的失神经肌萎缩的研究进展（３２）参考文献（４３）４中英文缩略词表（９）攻读学位期间发表文章情况巧０）致谢（５１）个人简历巧２）新乡医学院硕±论文骨髓间充质干细胞对防治失神经肌肉萎缩的实验研究摘要

5、目的：本实验将成年大鼠的骨髓细胞采用密度梯度离也法结合贴壁筛选法分离出骨髓间充质干细胞Ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ＢＭＳＣｓ进行培养、传代，（）并选取ＢＭＳＣｓＣＤ４４及ＣＤ４５抗原表型来鉴定获得干细胞，然后注入大鼠失神经肌肉模型的神经断端，观察骨髓间充质干细胞对失神经支配骨骼肌萎缩的防治作用，并为临床治巧提供新的理论依据。方法；１取ＳＤ大鼠１只，无菌条件下取股骨和胚骨的骨髓细胞，将骨髓细施用ｐｅｒｃｏｌｌ分离液（比重１．０７７）分离骨髓间充质干细胞的单个核细胞，然后将单细胞悬液接种于含１５％小牛血清ＤＭＥＭ培养基进行培养

6、、纯化和扩増。描画出ＭＳＣｓ生长曲线，通过免疫组化法检测干细胞ＣＤ４４、ＣＤ４５表面标志物。２选取健康ＳＤ大鼠％只，切断左侧后肢坐骨神经制备神经缺损模型，随机分为５１５Ｘ１００２ｍｌ观察组和对照姐，观察组肌肉注射．个／ｍｌ的骨髓间充质干细胞悬液．，对照组注入同等剂量低糖ＤＭＥＭ培养液，分别于２、４、６周后对２组大鼠进行大体观察、检测肌湿重、肌纤维横截面积、坐骨神经指数（ＳＦＩ），免疫组织化学法检测肌－ａｘ肉组织Ｂｄ２、Ｂ的表达变化。＇结果：利用密度梯度离也结合贴壁筛选法能有效分离纯化ＢＭＳＣｓ，培养出的细胞均具有典型的干细胞形态特征，传代后细胞增殖速度较快。Ｂ

7、ＭＳＣｓ标志物ＣＤ４４呈阳性表达，造血干细胞标志物ＣＤ４５阴性表达。造模后２、４、６周，观察组大鼠邸肠肌湿重、排肠肌纤维横截面积均显著高于对照组，ＳＦＩ则显著高于对照组，差异均具＜０－有统计学意义（戶．０５）。术后２、４、６周，观察组肌肉组织中化１２旧性细胞表达强度均高于对照组，Ｂａｘ阳性细胞表达强度均低于对照组，差异均具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结沦１ＳＣ．用密度