非编码rna调控食管癌转移的功能机制研究

非编码rna调控食管癌转移的功能机制研究

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1、中@聲3刮《巧>硕±研究生学位论文北京协和医学院研究生院学校代码:00213学号:S2012003005硕:t学位论文非编码RNA调控食管癌转移的功能机制研究The-FunctionandMechanis村CStudyofnoncodingRNA:asisofEsohaealSuamousCelinTheMetastpgqlCarcinoma所院:肿瘤医院姓名;刘玲燕指导教师;宋咏梅教授导师小姐:詹启敏教授王绿化教授学科专业:细胞生物学研究方向:分子肿瘤学完成日期二〇—五年九月:北京协和医学院中

2、国医学科学院硕上毕业论文目录目录g录1图表索引2缩略语表5中焦要7英鐘要9一部A11第前言12材料与方法19实验结果38讨2A5小S56第二部分57前S58才才料与方法60实验结果65讨论74小结77参考文献78基金资助8485发表鼓文献综述86个人简历93致谢95独创性声明961北京协和医学院中国医学科学院硕±毕化论文图表索引图表索引第一部分图1两种类型snoRNA的结构14、图2snoRNA结合的核也蛋白1

3、5图330例T化期食管癌梳本芯片结果38图4snord75在另外独立于巧片的食管癌淋巴结转移与非转移样本中的表达...39一图5snord75在两例正常食管组织、株永生化及十株食管癌细胞系中的表&39S5一图6GA在两例正常食管姐织、株永生化及十株食管癌细胞系中的表达..40图7snord75siRNA及表达质粒在食管癌细胞中的转染效率40图8瞬时转染snord75siRNA及表达质粒对食管癌细胞増殖能力的影响…41图9瞬时转染snord75SiRNA及表达质粒对食管癌细胞克隆形成能力的影^41图10瞬时转染snord75

4、SiRNA及表达质粒对食营癌细胞侵袭迁移能力的影响42图snord75表达4311下调影响细胞周期进程图12snord75表达下调影响细胞调亡43图13稳定高表达snord75对食管癌细胞生长、克隆及侵袭迁移的影响444图14筛选与snord75特异性结合的蛋白52北京协和医学院中国医学科学院硕±毕业论文图表索引图15westernblot鉴定S打ord75与ILF3蛋白结合46图snord75与ILF3蛋白特异性结合4616竞争化结合试验验证图17内源性snord75与IL巧蛋白之间的相互作用47图18snord75与I

5、LF3蛋白的调控关系47图19Chip实验验证ILF3与VEGFC之间的结合48图20双巧光报告基因实验检测ILF3对VEGFC转录活性的影响48图21siiord75、ILF3及VEGFCH者之间关系的模式图49图22snord75对裸鼠成瘤能力的影响50图23snord75在食管癌癌与癌旁组织中的表达50图24snord75在正常人及食管癌患者血浆中的表达51图25snord75的表达与病人生存预后的关系51第二部分-425在十株食管癌细胞系中的表达图1miR65-425图2miR在各个细胞系中的转染效率65

6、-图3m425对食66iR管癌增殖及克隆形成能力的影响-图4miR425对食管癌侵袭迁移的影响67’-图5miR425在SMAD2基因3UTR的结合位点683北京协和医学院中国医学科学院硕±毕业论文图表索引R-425的祀基因图6双羡光素酶报告基因实验验证mi68-图7转染miR425mimic后SMAD2m民NA的表达水平69-图8转染miR425模拟物后WB检测相关基因蛋白水平的变化的图9SMAD2在十株细胞系中的表达69-425模拟物后免疫巧光检测E-cadher图10转染miRin、Vimentin的表达....70-4

7、250图11miR在食管癌癌与癌旁姐织的表达7mR-图12i425在食管癌患者及正常人血浆中的表达71图13SMAD2在食管癌癌与癌旁组织中的表达71rman ̄425图14spea相关系数分析SMAD2与miR表达水平的相关性72一m-425的表这与收集的表iR食管癌组织患者中临床病理参数的关系72二m-表iR425的表达与收集的食管癌血液患者中临床病理参数

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