过表达拟南芥膜联蛋白基因ann8削弱rpw8.1介导的细胞死亡和抗病性

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1、分类号Ｓ４３２．１学号Ｓ２０１２２９１２＇．．－．—－Ｖ．四川农业大学硕ｄｒ学位论文过表达拟南芥膜联蛋白基因削弱灰戶Ｗ＆７介导的细胞死亡和抗病性－ＯｖｅｒｅｘｒｅｓｓｉｏｎｏｆＡ／ＶＡ／＜？ｃｏｍｒｏｍｉｓｅｓｐｐ－ＲＰＷ８．７ｍｅｄｉａｔｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈａｎｄｄｉｓｅａｓｅｒｅｓｉｓｌ：ａｎｃｅｉｎ心３缸如地公李琴巧导教师王义明研巧员导师组王文明李雜巧晶四川农业大学学科专业植物病理学？？１．，研巧方向植物抗病化及巧用

2、？．－Ｉ’：－占—２０巧年６月＇？．－．？Ｖ－？＾－■．［、论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研巧工作所取，得的成果，。尽我所知除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外学位论文中不包含其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：／ｋ关于论文使用授巧的声明，本人完全了解四

3、川农业大学有关保留、使用学位论文的规定即：学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。乐论文不做密，＼９。□本论文保密在＿＿年解密后适用本授权。＂＂（请在上□内划Ｖ）主年研究生签名：ｔ月义日Ａ义导师签名：＾７／ｆ广年＾月曰Ｉ目录摘要ｉｉＡｂｓｔｒａｃｔｉｖ符号说明ｖｉｉ一第章文献综述Ｉ１．１

4、植物的天然免疫系统１１．１．１（ＰＴＩ）１病原相关分子模式触发的免疫ｉｘ应１．１．２效应因子触发的免疫反应（ＥＴＩ）２１．２桓物Ｒ基因与病原菌无毒（Ａｖｒ）基因的互作模式３一１２１艮Ａｖ３．．基因与ｒ基因的直接互作模式（受体配体模式）１．２２ＲＡｖ．基因与ｒ基因的间接互作模式３１．２．３Ａｖｒ基因对民基因的转录调控４１．３ＲＰＷ８５拟南巧中广谱抗病蛋白的研究进展１．．３１ＲＰＷ８的结构特点５１３２ＲＰＷ８５．．的研究进展．．．．１３３ＲＰＷ８１和ＲＰＷ８２

5、功能对比６１．４膜联蛋白（Ａｎｎｅｘｉｎ）的研究进展７１．４１Ａｎｎ）７．膜験蛋白（ｅｘｉｎ功能概述１．４．２拟南芥膜联蛋白家族同源进化关系分析８１４３ｎｎｅｘｎ的８．．拟南芥中Ａｉ研巧进展１．５９论文研究目的及意义第二章材料与方法１０＞Ｉ２．１实验材料１０２丄１巧南芥材料１０２丄２工程菌和病原菌１０２丄３质粒载体１０２丄４分子生物学试剂１１２丄５试剂盒１３２丄６抗生素１３２丄７培养基１３２丄８主要的仪器设各１４２．２实驗方法

6、１４２．２．１ＡＮＮ８ｃＤＮＡ的制备１４２２ＮＮ２．．Ａ８超表达载体的构建１５２．２．３拟南芥的栽培与遗传转化１７２．２．４蛋白质印迹检测（ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）１８２．２．５ＲＮＡ的提取和反转１８．２．２６巧南ＤＮＡ的提取（ＳＤＳ法）１９芥—２．２．７拟南芥蛋白质的提取１９２．２．８拟南芥细胞死亡染色观察（ＴｉｙｐａｎＢｌｕｅ）２０２．２．９活性氧爆发（ＲＯＳ）的测定２０２．２．１０细菌生长实验２０２．２．１１白粉菌接苗实验及分生抱子数量统计

7、２１第Ｈ章结果与分析２２．１ＡＮＮ８３过表达转基因植株的鉴定２２）ＩＩ■．ＳＰＷ／３２过表达ＡＮＮ减弱了化义介导的抗病性２４３．３８减弱了介导的基础免疫反应过表达ＡＮＮ２６３．４过表法ＡＮＮ８降低了的转录水平２９３ＡＮＮ８Ｒ１Ｙ４／．５过表达降低了中Ｐｉ？和基因的表达量３０３－．６＾ＭＶＳ缺失突变体ｆｌｎｎＳ／糟强植物根对盐的敏感性３２３４第四章讨论与展望４．１在介导的抗性反应中起负调控作用３４４－．２缺失突变体ａｗｊＳ／增强植物根对盐的敏感性３４

8、４．３展望３５４．３．１ＡＮＮ８调控机制的探索３５４．３．２ＲＰＷ８．１ＡＮＮ８在植物３６和免疫反应中内在联系的探索参考文献３８附录４６附表．引物４６致谢４７１１１摘要巧南芥抗白粉病