核桃根部皮层内生微生物区系及拮抗菌筛选

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1、．１分类号＞Ｓ７６３学号：Ｓ２０１２３９０３画川农化大学硕女学位论文丰刻兆粮部皮层内生微生物区系及措抗識淸选刘泮指导教师朱天綻教榜四川旅＃大挙学科专业族林傑护堂研究方向森林病虫宗巧半物防治２０１５年６月ＣｌａｓｓＮｕｍｂｅｒ：Ｓ７６３．１ＳｔｕｄｅｎｔＩＤ：Ｓ２０１２３９０３ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＭａｓｔｅｒＤｅｇｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＭｉｃｒｏｂｉａｌＤｉｓｔｒｉｃｔＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＥｎｄｏｐｈｙｔｉｃＢａｃｔｅｒｉａａｎｄＡｎｔａｏｎ

2、ｉｓｔｉｃＢａｃｔｅｒｉａＳｃｒｅｅｎｉｎｇｇｉｎＷａｌｎｕｔＲｏｏｔＣｏｒｔｅｘＢｙＬｉｕＹａｎｇＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒｉＰｒｏｆ．ＺｈｕＴｉａｎｈｕｉＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｕｂｅｃｔ：ＦｏｒｅｓｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎＳｃｉｅｎｃｅｊＲｅｓｅａｒｃｈｄｉｒｅｃｔｉｏｎｉＦｏｒｅｓｔｅｓｔｓａｎｄｂｉｏｌｏｉｃａｌｃｏｎｔｒｏｌｐｇＪｕｎｅ２０１５，论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，学位论文中，除了文中特

3、别加标注和致谢的地方外不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。｜研究生签名：月日文知；＾年］／女关于论文使用授巧的声明本人完全了解四川农业火学巧关保留，：、使用学位论文的规定即学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被杳阅和巧阅，可Ｗ采Ｗ影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。

4、□本论文不保密。□本论文保密，在年解密巧适用本授权。＂＂（请在Ｗ上□内划Ｖ）研究生签名：為年＞月曰）＾｝弘度：１＾＾＾导师签名：年夕月主曰，乃《ｕ？＾ｅＡ摘要核桃／ｗａｎｓｒｅｕＺ．是核桃属植物中分布最广Ｃ知扭）、经济价值最大的栽培种，＂＂核桃的营养组分极其有益于人体健康，核桃被认为是２１世纪的超级食品，＂＂也是我国重要的木本粮油战略树种，具有良好的经济价值和社会效益。本研究通过对核桃根部皮层组织内生菌的物种多样性、群落组成及其优势种，了解核桃体内潜在生防菌等有益微生物群季节动态变化规律研究，Ｗ核桃根腐病病原菌为指示菌，筛选出对

5、其有枯抗作用的内生菌，并就如何发挥防病作用作一研究，为今后研发对这种根部腐烂病害有良好防治作用的生物农药奠定基础。利通过菌落形态观察，生理生化指标测定和分子生物学鉴定，将分离到的核桃内生菌进行了区系分析及季节动态变化研究，并对招抗菌株抑制根腐病的抗病机理进行初步研究，取得下主要成果：（１）核桃根部皮层经１２次分离纯化，共计得到６１株菌株，分属于１０个属，２９个种。经１６ＳｒＤＮＡ序列和投Ｔ序列分析及生理生化鉴定结果表明，内生菌株分属于细菌、真菌、放线菌Ｈ大类。核桃内生菌Ｗ细菌为主要类群，分离比例为９５公■．２７％（加切侃■０、ｒｅｖｗｎ況／績７化、泛

6、菌，包括芽袍杆菌属短波单胞菌属（）■属、肠杆菌属似）、假单胞菌属（Ａｅｗ成ｗｏｎｆｌｉＯ５个属，）ｗｏｍ其中芽抱杆菌属（化３切佩５）、假单胞菌属（＆ｅｗ成ｓＯ为主要优势菌群，分离比例分别为６１．３１％、２５．３４％，两个属的总比例大于８０％；真菌的分离比例为？成３．２７％，包括脆柄强属（化加航）、担子菌属（風Ｚ５７〇巧ｖｃｏ／ａ）、曲霉属说Ｗ＊（乂ｓｐｅ巧）、栓菌属（７＞ａｗＷｅ＾４个属；放线菌的分离比例为１．０１％，主要是链霉菌属（汉ｒｅｐ化ｗｙｃｅｓ）。这说明了核桃根部皮层组织中内生微生物的丰富性和多样性。（２）不同季节内生菌数量分析表明，核桃

7、在不同季节内内生菌种数量存在明显的差异变化，数据显示，内生菌数量随季节变化逐渐降低又升高，表现出春季＞冬季＞夏季＞秋季，春季和冬季内生菌数量最高；内生细菌数量随季节变化逐渐降低又升高，表现出春季＞冬季＞夏季＞秋季，冬季和春季内生细菌数量最高；内生放线菌数量随季节变化逐渐降低，表现出春季＞夏季＞秋季＞冬季；内生真菌数量随季节变化不明显。整体来看，核桃内生菌数量春冬季大于夏秋季。（３）在不同季节核桃内生菌株种类及其分离比例的分析结果表明，夏秋两季