中华鳖大脖子病的病原菌分离与鉴定

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3、ｎｅｎｓｉｓＢｉｇｎｅｃｋｄｉｓｅａｓｅ硏究生姓名颜丹凤指导教师钟蕾副教授校外指导教师乂海峰研究员学位类型专业学位学科领域渔业硏究方向水产动物医学论文答辩日期姑诚巧答辩妾员会主席论义评阅人王巧球ｉ围．二〇—五年六月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在指导老师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖南农业大学或其它教育机构的学位或证一书而使用过的材料。与我同

4、工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。一〇研究生签名：时间：年＾月／日３＾＾关于论文使用授权的说明本人完全了解湖南农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和电子稿，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意湖南农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容，并同意将由此产生的收益捐赠给学校教育基金会用于发展研究生教育。（保密的学位论文在解密后应遵守此协议）口研究生签名：时间：

5、年＾月／日导师签名？；藻时间；少年／月作曰摘要摘要’中华整ＴｈＯＭｙｘ加ｅｎ５，其营养丰富、肉味鲜美、（的是我国重要的名特淡水养殖品种滋补力强。中华整在野生环境下疾病很少发生，但是随着人工养殖生产的高密度和集约化发展，各类疾病频繁发生，中华整的病害问题成为当前制约其人工养殖业发展的一主要障碍之。本研究从患病中华整颈部及口腔分离出两株菌株，分别标号为１号和２号。为验证１号和２号菌的致病性，进行人工感染试验。实验结果表明：１号和２号混合感染的致病力大于１号和２号菌单独感染的致病力，且腹腔注射

6、法比浸泡法更易使健康中华整致病。对患病中华整主要器官进行組织病理学切片观察，发现其肠、肝、肺、肾、气管、脾脏、性腺等组织器官都发生明显病变，其中肺部组织病变最严重，可能由此导致中华整呼吸困难而窒息死亡。对１号和２号菌株进行生理生化鉴定，结合其形态特征，可Ｗ初步确定１号菌为是嗜水气单胞菌，送两种菌属于弗；２号菌为弗劳地构橡酸杆菌或者布拉克构橡酸杆菌劳地构嫁酸巧菌复合群一，但具体是哪种苗目前还尚无定论；分别对１号和２号苗株１６ＳｒＲＮＡ序列进行扩请，测序。将测序结果输入到ＮＣＢＩ中，用ＢＬＡＳＴ工具对序列：１号菌

7、株与嗜水气单胞菌的亲缘关系最近进行同源性比对分析，发现；２号苗株与弗劳地构稼酸杆菌亲缘关系最近。结合其形态恃征和生理生化鉴定结果，可Ｗ确定１号茜为嗜水气单胞苗，２号菌为弗劳地构嫁酸杆菌，即弗氏巧樣酸杆菌；药敏试验结果表明１号和２号菌对头抱他巧、头抱化朽、阿米卡星、环丙沙星、美洛培南抗生素高度敏感，对氨节西林和呢拉西林／他嗤己具有耐药性。本研究通过采集目前在湖南多个中华整养殖场发现的一种新的细菌性疾病＂中华＂整大脖子病的病样，进行病原的分离、纯化与１６ＳｒＲＮＡ序列分析，之后进行人工感染试验和组织病理学研究确定病原

8、的致病性，进而进行药物敏感性实验初步确定该病的治疗药物，为生产中治疗该病提供理论依据。关键词：中华整；大脖子病；嗜水气单胞菌；弗劳地构嫁酸杆菌Ｉ湖南农业大学全日制